CAJ | 학술논문

目的:制备具有高效价强特异性的抗HIV -1 p15(gag)鸡卵黄抗体(IgY),纯化并分析其免疫学活性.方法:用纯化的HIV -1 p15 (gag)蛋白抗原免疫蛋鸡,用水稀释法对IgY抗体进行粗提取并结合乙醇沉淀和氯化钠盐析法纯化抗体,再通过SDS- PAGE、Western blot、酶联免疫吸附实验(ELISA)检测抗体的纯度、特异性及效价.结果:表达纯化的HIV -1 p15 (gag) - GST融合蛋白分子量为45kDa,用于抗体检测的抗原.用纯化的His - P15蛋白作为免疫原免疫蛋鸡后,获得的卵黄抗体重链、轻链分子量分别为65kDa和25kDa.8倍体积水稀释卵黄,pH值5.1,20％冰乙醇及0.028mol/L盐溶液分离纯化,纯度可达96％,每毫升卵黄液可得到的卵黄抗体为9.8mg.终浓度为18％～25％的冰乙醇纯化的抗体浓度高且稳定,同时具有较强的特异性和较高的效价.结论:用HIV - 1p15 (gag)蛋白免疫蛋鸡,可以获得高效价的特异性抗体IgY,为IgY抗体在HIV - 1p15蛋白的研究奠定了实验基础.
목적:제비구유고효개강특이성적항HIV -1 p15(gag)계란황항체(IgY),순화병분석기면역학활성.방법:용순화적HIV -1 p15 (gag)단백항원면역단계,용수희석법대IgY항체진행조제취병결합을순침정화록화납염석법순화항체,재통과SDS- PAGE、Western blot、매련면역흡부실험(ELISA)검측항체적순도、특이성급효개.결과:표체순화적HIV -1 p15 (gag) - GST융합단백분자량위45kDa,용우항체검측적항원.용순화적His - P15단백작위면역원면역단계후,획득적란황항체중련、경련분자량분별위65kDa화25kDa.8배체적수희석란황,pH치5.1,20％빙을순급0.028mol/L염용액분리순화,순도가체96％,매호승란황액가득도적란황항체위9.8mg.종농도위18％～25％적빙을순순화적항체농도고차은정,동시구유교강적특이성화교고적효개.결론:용HIV - 1p15 (gag)단백면역단계,가이획득고효개적특이성항체IgY,위IgY항체재HIV - 1p15단백적연구전정료실험기출.