CAJ | 학술논문

目的建立噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌试验方法,探讨最佳检测条件.方法应用分枝杆菌噬菌体感染结核分枝杆菌,比较各种检测条件对测定结果的影响,并将所建方法用于痰标本检测,结果与BIOTEC Lab公司产品比较.结果 1×109噬菌斑形成单位(PFU)/ml的噬菌体,37℃感染 60 min可检出200～500条/ml结核分枝杆菌.杀毒剂100 mmol /ml,室温作用5 min可完全灭活受试噬菌体.指示细胞浓度在1×108条/ml 时,形成的噬菌斑清晰,便于计数.加热灭活的细菌和指示细胞不被噬菌体感染.H37Rv、H37Ra和牛分枝杆菌参考菌株检测结果均为阳性,7种非分枝杆菌和16种常见非结核分枝杆菌检测结果为阴性,4种非结核分枝杆菌(偶然、胞内、金色、草分枝杆菌)在高浓度时(>1×105条/ml)检测结果为阳性.重复试验结果表明,本法批间和批内变异系数均<15%.痰标本氢氧化钠-半胱氨酸液化方式的阳性检出率为94%(49/52),显著高于氢氧化钠液化结果的62%(32/52,χ2＝15.06,P<0.01);预培养1 d的阳性检出率为65%(51/78),显著高于未预培养结果的40%(31/78,χ2＝18.05,P<0.01).临床标本检测结果表明,我们的试剂与进口试剂检测结果基本相同.结论噬菌体生物扩增法快速、简便、灵敏,有助于结核分枝杆菌的快速检测,但是测定条件的选择极为重要.
목적건립서균체생물확증법쾌속검측결핵분지간균시험방법,탐토최가검측조건.방법응용분지간균서균체감염결핵분지간균,비교각충검측조건대측정결과적영향,병장소건방법용우담표본검측,결과여BIOTEC Lab공사산품비교.결과 1×109서균반형성단위(PFU)/ml적서균체,37℃감염 60 min가검출200～500조/ml결핵분지간균.살독제100 mmol /ml,실온작용5 min가완전멸활수시서균체.지시세포농도재1×108조/ml 시,형성적서균반청석,편우계수.가열멸활적세균화지시세포불피서균체감염.H37Rv、H37Ra화우분지간균삼고균주검측결과균위양성,7충비분지간균화16충상견비결핵분지간균검측결과위음성,4충비결핵분지간균(우연、포내、금색、초분지간균)재고농도시(>1×105조/ml)검측결과위양성.중복시험결과표명,본법비간화비내변이계수균<15%.담표본경양화납-반광안산액화방식적양성검출솔위94%(49/52),현저고우경양화납액화결과적62%(32/52,χ2＝15.06,P<0.01);예배양1 d적양성검출솔위65%(51/78),현저고우미예배양결과적40%(31/78,χ2＝18.05,P<0.01).림상표본검측결과표명,아문적시제여진구시제검측결과기본상동.결론서균체생물확증법쾌속、간편、령민,유조우결핵분지간균적쾌속검측,단시측정조건적선택겁위중요.