第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2003年
1期
43-45
,共3页
柏银兰%李元%李别虎%薛莹%范雄林%徐志凯
柏銀蘭%李元%李彆虎%薛瑩%範雄林%徐誌凱
백은란%리원%리별호%설형%범웅림%서지개
结核分枝杆菌%分泌蛋白%MPT64%克隆%表达
結覈分枝桿菌%分泌蛋白%MPT64%剋隆%錶達
결핵분지간균%분비단백%MPT64%극륭%표체
目的: 构建表达结核分枝杆菌分泌蛋白MPT64重组质粒,并在大肠杆菌中表达获得基因重组蛋白. 方法: 用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增出MPT64基因片段,插入pGEM-T-easy载体中,序列测定正确后,将其亚克隆到表达载体pProEX HTb中,在大肠杆菌DH5α中表达. 结果: 获得结核分枝杆菌MPT64成熟蛋白基因,经序列测定与GenBank公布的序列完全一致;表达蛋白经SDS-PAGE分析,相对分子质量与文献报道一致;重组蛋白经蛋白印迹实验,在Mr 2.6×104位置有特异条带. MPT64蛋白在宿主菌中表达量约占菌体总蛋白的13.5%. 结论: 基因重组表达的融合蛋白有可能作为有效抗原用于结核病的预防疫苗的研制和皮肤免疫诊断试剂的制备.
目的: 構建錶達結覈分枝桿菌分泌蛋白MPT64重組質粒,併在大腸桿菌中錶達穫得基因重組蛋白. 方法: 用PCR方法從結覈分枝桿菌H37Rv基因組擴增齣MPT64基因片段,插入pGEM-T-easy載體中,序列測定正確後,將其亞剋隆到錶達載體pProEX HTb中,在大腸桿菌DH5α中錶達. 結果: 穫得結覈分枝桿菌MPT64成熟蛋白基因,經序列測定與GenBank公佈的序列完全一緻;錶達蛋白經SDS-PAGE分析,相對分子質量與文獻報道一緻;重組蛋白經蛋白印跡實驗,在Mr 2.6×104位置有特異條帶. MPT64蛋白在宿主菌中錶達量約佔菌體總蛋白的13.5%. 結論: 基因重組錶達的融閤蛋白有可能作為有效抗原用于結覈病的預防疫苗的研製和皮膚免疫診斷試劑的製備.
목적: 구건표체결핵분지간균분비단백MPT64중조질립,병재대장간균중표체획득기인중조단백. 방법: 용PCR방법종결핵분지간균H37Rv기인조확증출MPT64기인편단,삽입pGEM-T-easy재체중,서렬측정정학후,장기아극륭도표체재체pProEX HTb중,재대장간균DH5α중표체. 결과: 획득결핵분지간균MPT64성숙단백기인,경서렬측정여GenBank공포적서렬완전일치;표체단백경SDS-PAGE분석,상대분자질량여문헌보도일치;중조단백경단백인적실험,재Mr 2.6×104위치유특이조대. MPT64단백재숙주균중표체량약점균체총단백적13.5%. 결론: 기인중조표체적융합단백유가능작위유효항원용우결핵병적예방역묘적연제화피부면역진단시제적제비.
