解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2000年
2期
148-151,插图第15页
,共5页
曹善津%钱和年%冯捷%付天云%叶雪%刘蓓%姚煜%刘广芝
曹善津%錢和年%馮捷%付天雲%葉雪%劉蓓%姚煜%劉廣芝
조선진%전화년%풍첩%부천운%협설%류배%요욱%류엄지
卵巢肿瘤/耐药性%人乳头瘤病毒
卵巢腫瘤/耐藥性%人乳頭瘤病毒
란소종류/내약성%인유두류병독
目的人乳头瘤病毒16型E6E7区基因编码的蛋白具有转导人上皮细胞,使之获得永生化特性的作用.为建立卵巢癌永生细胞系,我们对HPV16E6E7转导卵巢癌细胞的方法及转导细胞对顺铂的耐药性进行了研究. 方法采用脂质体方法,将含有HPV16E6E7的重组逆转录病毒载体pLXSN16E6E7,转染逆转录病毒包装细胞PT67,经G418筛选,病毒滴度测定,筛选出1株高滴度(1.9×107/ml)的产病毒克隆,将之转导卵巢癌细胞系SKOV3、3AO,各筛选出1株稳定表达HPV16E6E7的克隆,SKOV3/E6E7、3AO/E6E7.经RT-PCR、免疫细胞化学检测证实HPV16E6E7的表达,之后采用MTT法检测了HPV16E6E7转导的卵巢癌细胞系对顺铂耐药性的变化.结果 HPV16E6E7转导的卵巢癌细胞系SKOV3/E6E7、3AO/E6E7对顺铂的耐药性无改变. 结论 HPV16E6E7转导的卵巢癌细胞没有发生顺铂耐药性的改变.本研究为采用此法建立卵巢癌永生细胞系,特别是建立耐药卵巢癌细胞系奠定了基础.
目的人乳頭瘤病毒16型E6E7區基因編碼的蛋白具有轉導人上皮細胞,使之穫得永生化特性的作用.為建立卵巢癌永生細胞繫,我們對HPV16E6E7轉導卵巢癌細胞的方法及轉導細胞對順鉑的耐藥性進行瞭研究. 方法採用脂質體方法,將含有HPV16E6E7的重組逆轉錄病毒載體pLXSN16E6E7,轉染逆轉錄病毒包裝細胞PT67,經G418篩選,病毒滴度測定,篩選齣1株高滴度(1.9×107/ml)的產病毒剋隆,將之轉導卵巢癌細胞繫SKOV3、3AO,各篩選齣1株穩定錶達HPV16E6E7的剋隆,SKOV3/E6E7、3AO/E6E7.經RT-PCR、免疫細胞化學檢測證實HPV16E6E7的錶達,之後採用MTT法檢測瞭HPV16E6E7轉導的卵巢癌細胞繫對順鉑耐藥性的變化.結果 HPV16E6E7轉導的卵巢癌細胞繫SKOV3/E6E7、3AO/E6E7對順鉑的耐藥性無改變. 結論 HPV16E6E7轉導的卵巢癌細胞沒有髮生順鉑耐藥性的改變.本研究為採用此法建立卵巢癌永生細胞繫,特彆是建立耐藥卵巢癌細胞繫奠定瞭基礎.
목적인유두류병독16형E6E7구기인편마적단백구유전도인상피세포,사지획득영생화특성적작용.위건립란소암영생세포계,아문대HPV16E6E7전도란소암세포적방법급전도세포대순박적내약성진행료연구. 방법채용지질체방법,장함유HPV16E6E7적중조역전록병독재체pLXSN16E6E7,전염역전록병독포장세포PT67,경G418사선,병독적도측정,사선출1주고적도(1.9×107/ml)적산병독극륭,장지전도란소암세포계SKOV3、3AO,각사선출1주은정표체HPV16E6E7적극륭,SKOV3/E6E7、3AO/E6E7.경RT-PCR、면역세포화학검측증실HPV16E6E7적표체,지후채용MTT법검측료HPV16E6E7전도적란소암세포계대순박내약성적변화.결과 HPV16E6E7전도적란소암세포계SKOV3/E6E7、3AO/E6E7대순박적내약성무개변. 결론 HPV16E6E7전도적란소암세포몰유발생순박내약성적개변.본연구위채용차법건립란소암영생세포계,특별시건립내약란소암세포계전정료기출.
