中山大学学报(自然科学版)
中山大學學報(自然科學版)
중산대학학보(자연과학판)
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI
2003年
5期
59-62,81
,共5页
张擎%葛怡琛%潘瑞敏%徐培林
張擎%葛怡琛%潘瑞敏%徐培林
장경%갈이침%반서민%서배림
c-Mpl XP1%表达%水溶性%稳定性%活性
c-Mpl XP1%錶達%水溶性%穩定性%活性
c-Mpl XP1%표체%수용성%은정성%활성
利用酵母双杂交系统从人体肝脏cDNA文库筛选到血小板生成素受体Mp1分子配体的xp1基因,构建pET-28(b)-xp1,pBV220-xp1和pBAD/gⅢA-xp1表达质粒,分别进行IPTG、温度和果糖诱导,表达产物利用小鼠巨核细胞集落形成单位测定活性.表达分析显示BL21/pET-28(b)-xp1水溶性XP1目的蛋白表达量为最高,活性最大;BL21/pBV220-xp1被短时、低温诱导后可增加表达目的蛋白的水溶性,但稳定性差,表达量和活性均不及BL21/pET-28(b)-xp1高;TOP10/pBAD/gⅢA-xp1不能分泌到细胞质周膜,以包涵体形式存在细胞内中,并且为无活性表达.
利用酵母雙雜交繫統從人體肝髒cDNA文庫篩選到血小闆生成素受體Mp1分子配體的xp1基因,構建pET-28(b)-xp1,pBV220-xp1和pBAD/gⅢA-xp1錶達質粒,分彆進行IPTG、溫度和果糖誘導,錶達產物利用小鼠巨覈細胞集落形成單位測定活性.錶達分析顯示BL21/pET-28(b)-xp1水溶性XP1目的蛋白錶達量為最高,活性最大;BL21/pBV220-xp1被短時、低溫誘導後可增加錶達目的蛋白的水溶性,但穩定性差,錶達量和活性均不及BL21/pET-28(b)-xp1高;TOP10/pBAD/gⅢA-xp1不能分泌到細胞質週膜,以包涵體形式存在細胞內中,併且為無活性錶達.
이용효모쌍잡교계통종인체간장cDNA문고사선도혈소판생성소수체Mp1분자배체적xp1기인,구건pET-28(b)-xp1,pBV220-xp1화pBAD/gⅢA-xp1표체질립,분별진행IPTG、온도화과당유도,표체산물이용소서거핵세포집락형성단위측정활성.표체분석현시BL21/pET-28(b)-xp1수용성XP1목적단백표체량위최고,활성최대;BL21/pBV220-xp1피단시、저온유도후가증가표체목적단백적수용성,단은정성차,표체량화활성균불급BL21/pET-28(b)-xp1고;TOP10/pBAD/gⅢA-xp1불능분비도세포질주막,이포함체형식존재세포내중,병차위무활성표체.
