蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2007年
1期
30-35
,共6页
周文林%王崇龙%刘波%曹广力%薛仁宇%沈卫德%贡成良
週文林%王崇龍%劉波%曹廣力%薛仁宇%瀋衛德%貢成良
주문림%왕숭룡%류파%조엄력%설인우%침위덕%공성량
转基因%家蚕%piggyBac转座子%家蚕细胞
轉基因%傢蠶%piggyBac轉座子%傢蠶細胞
전기인%가잠%piggyBac전좌자%가잠세포
为探讨稳定转化家蚕细胞表达外源基因的新方法,以家蚕核型多角体病毒(BmNPV)极早期蛋白基因(ie-1)启动子元件驱动新霉素抗性基因(neor),并克隆至具有绿色荧光蛋白基因(gfp)标记的昆虫转座子载体piggyBac中,构建转基因载体pigA3-IE-Neo.以该载体转染家蚕BmN细胞,用终浓度800 μg/mL的遗传霉素(geneticin, G418)筛选3个月,获得了稳定转化的细胞,呈现绿色荧光的细胞数达80%以上.通过PCR鉴定证实了细胞基因组DNA中neor基因和gfp基因的存在.
為探討穩定轉化傢蠶細胞錶達外源基因的新方法,以傢蠶覈型多角體病毒(BmNPV)極早期蛋白基因(ie-1)啟動子元件驅動新黴素抗性基因(neor),併剋隆至具有綠色熒光蛋白基因(gfp)標記的昆蟲轉座子載體piggyBac中,構建轉基因載體pigA3-IE-Neo.以該載體轉染傢蠶BmN細胞,用終濃度800 μg/mL的遺傳黴素(geneticin, G418)篩選3箇月,穫得瞭穩定轉化的細胞,呈現綠色熒光的細胞數達80%以上.通過PCR鑒定證實瞭細胞基因組DNA中neor基因和gfp基因的存在.
위탐토은정전화가잠세포표체외원기인적신방법,이가잠핵형다각체병독(BmNPV)겁조기단백기인(ie-1)계동자원건구동신매소항성기인(neor),병극륭지구유록색형광단백기인(gfp)표기적곤충전좌자재체piggyBac중,구건전기인재체pigA3-IE-Neo.이해재체전염가잠BmN세포,용종농도800 μg/mL적유전매소(geneticin, G418)사선3개월,획득료은정전화적세포,정현록색형광적세포수체80%이상.통과PCR감정증실료세포기인조DNA중neor기인화gfp기인적존재.
