细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2008年
5期
493-494
,共2页
李丙所%马龙洋%周红兵%党军强%任彦顺%窦科峰
李丙所%馬龍洋%週紅兵%黨軍彊%任彥順%竇科峰
리병소%마룡양%주홍병%당군강%임언순%두과봉
肝癌%单链抗体%CHO细胞%基因表达
肝癌%單鏈抗體%CHO細胞%基因錶達
간암%단련항체%CHO세포%기인표체
目的:构建人源肝癌单链抗体(scFv)基因真核表达载体pSeetag2/seFv并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中获得表达.方法:利用噬菌体细胞内重组技术筛选得到了肝癌特异性scFv,用PCR技术及核酸内切酶技术将其克隆入真核表达载体psectag2,构建重组载体pSectag2/scFv,测序鉴定后,电转染CHO细胞,利用SDS-PAGE和Western blot检测目的蛋白的表达情况.结果:将750 bp人源肝癌scFv插入真核表达载体pSectag2,经DNA测序鉴定正确,成功构建了pSectag2/scFv.将pSectag2/scFv转染CHO细胞后获得目的蛋白表达.SDS-PAGE和Western blot检测表明目的蛋白Mr约为34 000.结论:成功地构建抗scFv真核表达载体pSectag2/scFv,并在CHO细胞中获得表达,为人源肝癌scFv的进一步的应用研究提供依据.
目的:構建人源肝癌單鏈抗體(scFv)基因真覈錶達載體pSeetag2/seFv併在中國倉鼠卵巢(CHO)細胞中穫得錶達.方法:利用噬菌體細胞內重組技術篩選得到瞭肝癌特異性scFv,用PCR技術及覈痠內切酶技術將其剋隆入真覈錶達載體psectag2,構建重組載體pSectag2/scFv,測序鑒定後,電轉染CHO細胞,利用SDS-PAGE和Western blot檢測目的蛋白的錶達情況.結果:將750 bp人源肝癌scFv插入真覈錶達載體pSectag2,經DNA測序鑒定正確,成功構建瞭pSectag2/scFv.將pSectag2/scFv轉染CHO細胞後穫得目的蛋白錶達.SDS-PAGE和Western blot檢測錶明目的蛋白Mr約為34 000.結論:成功地構建抗scFv真覈錶達載體pSectag2/scFv,併在CHO細胞中穫得錶達,為人源肝癌scFv的進一步的應用研究提供依據.
목적:구건인원간암단련항체(scFv)기인진핵표체재체pSeetag2/seFv병재중국창서란소(CHO)세포중획득표체.방법:이용서균체세포내중조기술사선득도료간암특이성scFv,용PCR기술급핵산내절매기술장기극륭입진핵표체재체psectag2,구건중조재체pSectag2/scFv,측서감정후,전전염CHO세포,이용SDS-PAGE화Western blot검측목적단백적표체정황.결과:장750 bp인원간암scFv삽입진핵표체재체pSectag2,경DNA측서감정정학,성공구건료pSectag2/scFv.장pSectag2/scFv전염CHO세포후획득목적단백표체.SDS-PAGE화Western blot검측표명목적단백Mr약위34 000.결론:성공지구건항scFv진핵표체재체pSectag2/scFv,병재CHO세포중획득표체,위인원간암scFv적진일보적응용연구제공의거.
