天津医药
天津醫藥
천진의약
TIANJIN MEDICAL JOURNAL
2008年
1期
11-14,插1
,共5页
基因,病毒%基因疗法%腺病毒科%基因,转基因,自杀%基因表达
基因,病毒%基因療法%腺病毒科%基因,轉基因,自殺%基因錶達
기인,병독%기인요법%선병독과%기인,전기인,자살%기인표체
目的:构建含融合自杀基因CDglyTK复制型重组腺病毒,并在肺腺癌细胞A549中验证其复制能力和溶瘤特性.方法:建立重叠延伸PCR方法,用该方法制备的E1A-IRES片段插入AdEasy载体构建含融合自杀基因CDglyTK复制型重组腺病毒rAdE1A-cDglyTK.并用该病毒与复制缺陷型重组腺病毒rAd-CDglyTK分别感染肿瘤细胞A549,从荧光蛋白表达、细胞病变及病毒增殖等方面进行比较,以确定其复制能力及溶瘤特性.结果:成功构建了含融合自杀基因CDglyTK的复制型重组腺病毒rAdE1A-CDglyTK,该病毒感染肿瘤细胞A549后报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的表达,能大量增殖并出现明显的细胞病变效应(CPE).结论:构建的复制型重组腺病毒在肿瘤细胞内的复制能力、溶瘤特性和外源基因的表达明显优于目前广泛应用的复制缺陷型重组腺病毒.
目的:構建含融閤自殺基因CDglyTK複製型重組腺病毒,併在肺腺癌細胞A549中驗證其複製能力和溶瘤特性.方法:建立重疊延伸PCR方法,用該方法製備的E1A-IRES片段插入AdEasy載體構建含融閤自殺基因CDglyTK複製型重組腺病毒rAdE1A-cDglyTK.併用該病毒與複製缺陷型重組腺病毒rAd-CDglyTK分彆感染腫瘤細胞A549,從熒光蛋白錶達、細胞病變及病毒增殖等方麵進行比較,以確定其複製能力及溶瘤特性.結果:成功構建瞭含融閤自殺基因CDglyTK的複製型重組腺病毒rAdE1A-CDglyTK,該病毒感染腫瘤細胞A549後報告基因綠色熒光蛋白(GFP)的錶達,能大量增殖併齣現明顯的細胞病變效應(CPE).結論:構建的複製型重組腺病毒在腫瘤細胞內的複製能力、溶瘤特性和外源基因的錶達明顯優于目前廣汎應用的複製缺陷型重組腺病毒.
목적:구건함융합자살기인CDglyTK복제형중조선병독,병재폐선암세포A549중험증기복제능력화용류특성.방법:건립중첩연신PCR방법,용해방법제비적E1A-IRES편단삽입AdEasy재체구건함융합자살기인CDglyTK복제형중조선병독rAdE1A-cDglyTK.병용해병독여복제결함형중조선병독rAd-CDglyTK분별감염종류세포A549,종형광단백표체、세포병변급병독증식등방면진행비교,이학정기복제능력급용류특성.결과:성공구건료함융합자살기인CDglyTK적복제형중조선병독rAdE1A-CDglyTK,해병독감염종류세포A549후보고기인록색형광단백(GFP)적표체,능대량증식병출현명현적세포병변효응(CPE).결론:구건적복제형중조선병독재종류세포내적복제능력、용류특성화외원기인적표체명현우우목전엄범응용적복제결함형중조선병독.