猪繁殖与呼吸综合征病毒Taq Man-MGB荧光定量RT-PCR方法的建立和应用
저번식여호흡종합정병독Taq Man-MGB형광정량RT-PCR방법적건립화응용
Development and application of Taq Man-MGB fluorescence quantitative RT-PCR assay for detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus
  • 万方数据
    中国预防兽医学报 중국예방수의학보
    CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
    2008年 12期 944-948,991 ,共6页

    韦天超%田志军%安同庆%周艳君%肖燕%姜一峰%郝晓芳%张善瑞%彭金美%仇华吉%童光志

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    猪繁殖与呼吸综合征病毒%荧光定量RT-PCR%病毒含量 豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%熒光定量RT-PCR%病毒含量
    저번식여호흡종합정병독%형광정량RT-PCR%병독함량
    本研究设计针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF7基因的特异性引物和Taq Man荧光探针,建立了一种检测PRRSV的快速、敏感、特异和重复性好的TaqMan荧光定量RT-PCR方法.该方法在检测101拷贝/μL～107拷贝/μL模板范围内具有良好的线性关系,比常规RT-PCR更敏感,可分别检测最少为10拷贝的阳性标准品和1 TCID50病毒.用建立的方法检测高致病性变异株HuN4第5代和第65代体外传代细胞毒人工感染6周龄～7周龄仔猪后的0 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d、21 d血清样品,以及HuN4第5代病毒攻击仔猪21 d后迫杀的猪的脑、心、肝、脾、肺、肾和淋巴结等组织样品病毒含量,结果发现HuN4第5代病毒感染仔猪3 d后在血液中迅速复制,并在感染后7 d血清病毒含量达到最高峰,接近1010拷贝/mL.攻毒21 d后,上述内脏组织中肺脏含毒量最多,接近109拷贝/g.HuN4第65代病毒在人工感染猪后21 d的血清病毒含量最高,达到106拷贝/mL血清.4第5代和第65代体外传代细胞毒人工感染6周龄～7周龄仔猪后的0 h、3 h、5 h、7 h、10 h、14 h、21 h清样品,以及HuN4第5代病毒攻击仔猪21 d后迫杀的猪的脑、心、肝、脾、肺、肾和淋巴结等组织样品病毒含量,结果发现HuN4第5代病毒感染仔猪3 d后在血液中迅速复制,并在感染后7 d血清病毒含量达到最高峰,接近1010拷贝/mL.攻毒21 d后,上述内脏组织中肺脏含毒量最多,接近109拷贝/g.HuN4第65代病毒在人工感染猪后21 d的血清病毒含量最高,达到106拷贝/mL血清.4第5代和第65代体外传代细胞毒人工感染6周龄～7周龄仔猪后的0
    본연구설계침대저번식여호흡종합정병독(PRRSV)ORF7기인적특이성인물화Taq Man형광탐침,건립료일충검측PRRSV적쾌속、민감、특이화중복성호적TaqMan형광정량RT-PCR방법.해방법재검측101고패/μL～107고패/μL모판범위내구유량호적선성관계,비상규RT-PCR경민감,가분별검측최소위10고패적양성표준품화1 TCID50병독.용건립적방법검측고치병성변이주HuN4제5대화제65대체외전대세포독인공감염6주령～7주령자저후적0 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d、21 d혈청양품,이급HuN4제5대병독공격자저21 d후박살적저적뇌、심、간、비、폐、신화림파결등조직양품병독함량,결과발현HuN4제5대병독감염자저3 d후재혈액중신속복제,병재감염후7 d혈청병독함량체도최고봉,접근1010고패/mL.공독21 d후,상술내장조직중폐장함독량최다,접근109고패/g.HuN4제65대병독재인공감염저후21 d적혈청병독함량최고,체도106고패/mL혈청.4제5대화제65대체외전대세포독인공감염6주령～7주령자저후적0 h、3 h、5 h、7 h、10 h、14 h、21 h청양품,이급HuN4제5대병독공격자저21 d후박살적저적뇌、심、간、비、폐、신화림파결등조직양품병독함량,결과발현HuN4제5대병독감염자저3 d후재혈액중신속복제,병재감염후7 d혈청병독함량체도최고봉,접근1010고패/mL.공독21 d후,상술내장조직중폐장함독량최다,접근109고패/g.HuN4제65대병독재인공감염저후21 d적혈청병독함량최고,체도106고패/mL혈청.4제5대화제65대체외전대세포독인공감염6주령～7주령자저후적0
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