中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2012年
8期
681-684
,共4页
王娜%王玉珍%万永青%谢基明%康鸿斌%刘春霞
王娜%王玉珍%萬永青%謝基明%康鴻斌%劉春霞
왕나%왕옥진%만영청%사기명%강홍빈%류춘하
Rab7%CpG%Rab7T22N%RAW264.7细胞
Rab7%CpG%Rab7T22N%RAW264.7細胞
Rab7%CpG%Rab7T22N%RAW264.7세포
目的:研究Rab7过表达及失活突变(Rab7T22N)对CpG刺激的RAW264.7巨噬细胞中分泌细胞因子的影响.方法:采用RT-PCR和Real-time PCR检测RAW264.7细胞中Rab7在CpG刺激下表达模式.将Rab7真核表达质粒及失活突变质粒Rab7T22N 通过脂质体法转染RAW264.7细胞,G418稳定筛选,Western法鉴定表达效果.用CpG刺激稳定表达Rab7的RAW264.7细胞系,RT-PCR和Real-time PCR检测细胞因子IL-6、IL-1β、IFN-β的表达量变化.结果:CpG刺激RAW264.7后,Rab7 mRNA表达水平逐渐增高,在8小时达到高峰,表达增高近4倍.Rab7过表达后,CpG刺激后产生的IL-6、IL-1β、IFN-β显著降低.巨噬细胞中Rab7失活突变后,在CpG刺激后IL-6、IL-1β、IFN-β的表达又显著增加.结论:CpG促进RAW264.7巨噬细胞中Rab7 mRNA的表达,Rab7抑制了CpG刺激的巨噬细胞中IL-6、IL-1β、IFN-β的表达,该抑制作用的发挥与其酶活性的GTP结合有关.该研究为进一步阐明Rab7在CpG/TLR9信号通路中的作用奠定了基础.
目的:研究Rab7過錶達及失活突變(Rab7T22N)對CpG刺激的RAW264.7巨噬細胞中分泌細胞因子的影響.方法:採用RT-PCR和Real-time PCR檢測RAW264.7細胞中Rab7在CpG刺激下錶達模式.將Rab7真覈錶達質粒及失活突變質粒Rab7T22N 通過脂質體法轉染RAW264.7細胞,G418穩定篩選,Western法鑒定錶達效果.用CpG刺激穩定錶達Rab7的RAW264.7細胞繫,RT-PCR和Real-time PCR檢測細胞因子IL-6、IL-1β、IFN-β的錶達量變化.結果:CpG刺激RAW264.7後,Rab7 mRNA錶達水平逐漸增高,在8小時達到高峰,錶達增高近4倍.Rab7過錶達後,CpG刺激後產生的IL-6、IL-1β、IFN-β顯著降低.巨噬細胞中Rab7失活突變後,在CpG刺激後IL-6、IL-1β、IFN-β的錶達又顯著增加.結論:CpG促進RAW264.7巨噬細胞中Rab7 mRNA的錶達,Rab7抑製瞭CpG刺激的巨噬細胞中IL-6、IL-1β、IFN-β的錶達,該抑製作用的髮揮與其酶活性的GTP結閤有關.該研究為進一步闡明Rab7在CpG/TLR9信號通路中的作用奠定瞭基礎.
목적:연구Rab7과표체급실활돌변(Rab7T22N)대CpG자격적RAW264.7거서세포중분비세포인자적영향.방법:채용RT-PCR화Real-time PCR검측RAW264.7세포중Rab7재CpG자격하표체모식.장Rab7진핵표체질립급실활돌변질립Rab7T22N 통과지질체법전염RAW264.7세포,G418은정사선,Western법감정표체효과.용CpG자격은정표체Rab7적RAW264.7세포계,RT-PCR화Real-time PCR검측세포인자IL-6、IL-1β、IFN-β적표체량변화.결과:CpG자격RAW264.7후,Rab7 mRNA표체수평축점증고,재8소시체도고봉,표체증고근4배.Rab7과표체후,CpG자격후산생적IL-6、IL-1β、IFN-β현저강저.거서세포중Rab7실활돌변후,재CpG자격후IL-6、IL-1β、IFN-β적표체우현저증가.결론:CpG촉진RAW264.7거서세포중Rab7 mRNA적표체,Rab7억제료CpG자격적거서세포중IL-6、IL-1β、IFN-β적표체,해억제작용적발휘여기매활성적GTP결합유관.해연구위진일보천명Rab7재CpG/TLR9신호통로중적작용전정료기출.
