武汉大学学报（理学版）
武漢大學學報（理學版）
무한대학학보（이학판）
JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2005年
4期
467-471
,共5页
王军%于雯华%康舒里%肖庚富
王軍%于雯華%康舒裏%肖庚富
왕군%우문화%강서리%초경부
肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体%蛋白纯化%抗肿瘤活性
腫瘤壞死因子相關的凋亡誘導配體%蛋白純化%抗腫瘤活性
종류배사인자상관적조망유도배체%단백순화%항종류활성
取健康人外周血得到总RNA,利用RT-PCR获取全长TRAILcDNA,以此为模板,在2对不同的引物下作PCR,得到不同长度的DNA片段,克隆到表达载体pET30a,得到重组质粒pET30a-TRAIL(114～281)和pET30a-TRAIL(120～281),转化E.coli BL21(DE3)pLySs表达并纯化了2种不同长度的可溶性蛋白,分别是TRAIL(114～281)(蛋白A), TRAIL(120～281 )(蛋白B).经MTT(四甲基偶氮唑盐)实验表明蛋白B能在6 h内抑制不同类型的肿瘤细胞增殖,但其活性明显弱于蛋白A.
取健康人外週血得到總RNA,利用RT-PCR穫取全長TRAILcDNA,以此為模闆,在2對不同的引物下作PCR,得到不同長度的DNA片段,剋隆到錶達載體pET30a,得到重組質粒pET30a-TRAIL(114～281)和pET30a-TRAIL(120～281),轉化E.coli BL21(DE3)pLySs錶達併純化瞭2種不同長度的可溶性蛋白,分彆是TRAIL(114～281)(蛋白A), TRAIL(120～281 )(蛋白B).經MTT(四甲基偶氮唑鹽)實驗錶明蛋白B能在6 h內抑製不同類型的腫瘤細胞增殖,但其活性明顯弱于蛋白A.
취건강인외주혈득도총RNA,이용RT-PCR획취전장TRAILcDNA,이차위모판,재2대불동적인물하작PCR,득도불동장도적DNA편단,극륭도표체재체pET30a,득도중조질립pET30a-TRAIL(114～281)화pET30a-TRAIL(120～281),전화E.coli BL21(DE3)pLySs표체병순화료2충불동장도적가용성단백,분별시TRAIL(114～281)(단백A), TRAIL(120～281 )(단백B).경MTT(사갑기우담서염)실험표명단백B능재6 h내억제불동류형적종류세포증식,단기활성명현약우단백A.
