癌症
癌癥
암증
CHINESE JOURNAL OF CANCER
2006年
7期
811-817
,共7页
左泽华%赵旻%刘娟%魏芸%伍欣星
左澤華%趙旻%劉娟%魏蕓%伍訢星
좌택화%조민%류연%위예%오흔성
宫颈肿瘤%HeLa细胞%膀胱癌相关蛋白基因%抑癌基因
宮頸腫瘤%HeLa細胞%膀胱癌相關蛋白基因%抑癌基因
궁경종류%HeLa세포%방광암상관단백기인%억암기인
背景与目的:通过癌基因与抑癌基因的基因分类表达芯片筛选发现,在宫颈癌组织中,膀胱癌相关蛋白基因(bladder cancer related protein,BLCAP)表达降低最为明显.提示该基因可能与宫颈癌发生相关.本研究旨在探讨该基因对宫颈癌细胞增殖的抑制作用.方法:用RT-PCR法检测54例宫颈癌组织和25正常宫颈组织中BLCAP基因的表达情况.制备BLCAP全长cDNA并克隆到真核表达载体pLXSN上,稳定转染至宫颈癌细胞系HeLa中,细胞计数方法和克隆形成实验观察稳定转染BLCAP基因的HeLa细胞的细胞形态、细胞增殖及集落形成能力;利用DNA ladder检测BLCAP基因引起HeLa细胞凋亡情况;裸鼠体内抑瘤实验观察BLCAP基因的抑瘤作用.结果:BLCAP在宫颈癌组织中不表达或低表达,与正常宫颈组织相比明显降低;转染BLCAP基因的HeLa细胞倍增时间为69.4 h,较未转染HeLa细胞(27.5h)和转染空载体的HeLa细胞(30.2 h)明显延长,差异有显著性(P＜0.05);细胞同步对比实验显示,转染BLCAP基因的HeLa细胞的克隆形成率明显低于未转染HeLa细胞(t=5.98,P＜0.01)和转染空载体的HeLa细胞(t=4.69,P＜0.01);HeLa细胞在转染BLCAP基因后出现了DNA梯形条带.将转染BLCAP基因的HeLa细胞、转染空载体的HeLa细胞和未转染的HeLa细胞分别注射入BALB/c裸鼠体内,30天后处死动物,剥离肿瘤组织并称重,各组平均瘤重分别为1.015 g、1.612 g和1.530 g,转染BLCAP基因的细胞抑瘤能力与两对照组相比,差异有显著性(P＜0.05).肿瘤病理切片结果显示,稳定转染BLCAP基因的HeLa细胞所成肿瘤组织,癌组织被纤维组织包裹,边缘整齐,未侵犯肌层和脂肪组织,部分癌巢边缘癌细胞可见散在类似凋亡细胞的细胞群.而未转染质粒组及转染空载体pLXSN质粒组所成肿瘤组织癌组织突破肌层呈浸润性生长,癌巢边缘癌细胞病理性核分裂像多见.结论:BLCAP基因在宫颈癌组织中表达下调,对HeLa细胞的增殖具有明显抑制作用,为宫颈癌相关候选抑癌基因.
揹景與目的:通過癌基因與抑癌基因的基因分類錶達芯片篩選髮現,在宮頸癌組織中,膀胱癌相關蛋白基因(bladder cancer related protein,BLCAP)錶達降低最為明顯.提示該基因可能與宮頸癌髮生相關.本研究旨在探討該基因對宮頸癌細胞增殖的抑製作用.方法:用RT-PCR法檢測54例宮頸癌組織和25正常宮頸組織中BLCAP基因的錶達情況.製備BLCAP全長cDNA併剋隆到真覈錶達載體pLXSN上,穩定轉染至宮頸癌細胞繫HeLa中,細胞計數方法和剋隆形成實驗觀察穩定轉染BLCAP基因的HeLa細胞的細胞形態、細胞增殖及集落形成能力;利用DNA ladder檢測BLCAP基因引起HeLa細胞凋亡情況;裸鼠體內抑瘤實驗觀察BLCAP基因的抑瘤作用.結果:BLCAP在宮頸癌組織中不錶達或低錶達,與正常宮頸組織相比明顯降低;轉染BLCAP基因的HeLa細胞倍增時間為69.4 h,較未轉染HeLa細胞(27.5h)和轉染空載體的HeLa細胞(30.2 h)明顯延長,差異有顯著性(P＜0.05);細胞同步對比實驗顯示,轉染BLCAP基因的HeLa細胞的剋隆形成率明顯低于未轉染HeLa細胞(t=5.98,P＜0.01)和轉染空載體的HeLa細胞(t=4.69,P＜0.01);HeLa細胞在轉染BLCAP基因後齣現瞭DNA梯形條帶.將轉染BLCAP基因的HeLa細胞、轉染空載體的HeLa細胞和未轉染的HeLa細胞分彆註射入BALB/c裸鼠體內,30天後處死動物,剝離腫瘤組織併稱重,各組平均瘤重分彆為1.015 g、1.612 g和1.530 g,轉染BLCAP基因的細胞抑瘤能力與兩對照組相比,差異有顯著性(P＜0.05).腫瘤病理切片結果顯示,穩定轉染BLCAP基因的HeLa細胞所成腫瘤組織,癌組織被纖維組織包裹,邊緣整齊,未侵犯肌層和脂肪組織,部分癌巢邊緣癌細胞可見散在類似凋亡細胞的細胞群.而未轉染質粒組及轉染空載體pLXSN質粒組所成腫瘤組織癌組織突破肌層呈浸潤性生長,癌巢邊緣癌細胞病理性覈分裂像多見.結論:BLCAP基因在宮頸癌組織中錶達下調,對HeLa細胞的增殖具有明顯抑製作用,為宮頸癌相關候選抑癌基因.
배경여목적:통과암기인여억암기인적기인분류표체심편사선발현,재궁경암조직중,방광암상관단백기인(bladder cancer related protein,BLCAP)표체강저최위명현.제시해기인가능여궁경암발생상관.본연구지재탐토해기인대궁경암세포증식적억제작용.방법:용RT-PCR법검측54례궁경암조직화25정상궁경조직중BLCAP기인적표체정황.제비BLCAP전장cDNA병극륭도진핵표체재체pLXSN상,은정전염지궁경암세포계HeLa중,세포계수방법화극륭형성실험관찰은정전염BLCAP기인적HeLa세포적세포형태、세포증식급집락형성능력;이용DNA ladder검측BLCAP기인인기HeLa세포조망정황;라서체내억류실험관찰BLCAP기인적억류작용.결과:BLCAP재궁경암조직중불표체혹저표체,여정상궁경조직상비명현강저;전염BLCAP기인적HeLa세포배증시간위69.4 h,교미전염HeLa세포(27.5h)화전염공재체적HeLa세포(30.2 h)명현연장,차이유현저성(P＜0.05);세포동보대비실험현시,전염BLCAP기인적HeLa세포적극륭형성솔명현저우미전염HeLa세포(t=5.98,P＜0.01)화전염공재체적HeLa세포(t=4.69,P＜0.01);HeLa세포재전염BLCAP기인후출현료DNA제형조대.장전염BLCAP기인적HeLa세포、전염공재체적HeLa세포화미전염적HeLa세포분별주사입BALB/c라서체내,30천후처사동물,박리종류조직병칭중,각조평균류중분별위1.015 g、1.612 g화1.530 g,전염BLCAP기인적세포억류능력여량대조조상비,차이유현저성(P＜0.05).종류병리절편결과현시,은정전염BLCAP기인적HeLa세포소성종류조직,암조직피섬유조직포과,변연정제,미침범기층화지방조직,부분암소변연암세포가견산재유사조망세포적세포군.이미전염질립조급전염공재체pLXSN질립조소성종류조직암조직돌파기층정침윤성생장,암소변연암세포병이성핵분렬상다견.결론:BLCAP기인재궁경암조직중표체하조,대HeLa세포적증식구유명현억제작용,위궁경암상관후선억암기인.
