微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2006年
6期
1014-1017
,共4页
钮利喜%张学尧%石亚伟%袁静明
鈕利喜%張學堯%石亞偉%袁靜明
뉴리희%장학요%석아위%원정명
重组D-海因酶%突变酶%分子形式%稳定性
重組D-海因酶%突變酶%分子形式%穩定性
중조D-해인매%돌변매%분자형식%은정성
报道D-海因酶分子C-末端 Arg残基的缺失,导致酶的解聚与稳定性的显著改变.用基因克隆、表达与纯化的方法,制备了重组D-海因酶(P479)及其C-末端残基Arg缺失的D-海因酶(P478).SDS-PAGE和Native-PAGE分析表明,在完全相同的条件下,两者单体的分子量相同;但天然P479为二聚体,而P478为单体并保持约40%催化底物海因的活性.突变酶P478的pH值稳定性显著增加,抗SDS能力亦有所提高,但热稳定性明显降低.结果预示:D-海因酶的C-末端残基Arg显著影响酶的分子形式及热稳定性,虽也影响酶活性,但非酶活性所必需.
報道D-海因酶分子C-末耑 Arg殘基的缺失,導緻酶的解聚與穩定性的顯著改變.用基因剋隆、錶達與純化的方法,製備瞭重組D-海因酶(P479)及其C-末耑殘基Arg缺失的D-海因酶(P478).SDS-PAGE和Native-PAGE分析錶明,在完全相同的條件下,兩者單體的分子量相同;但天然P479為二聚體,而P478為單體併保持約40%催化底物海因的活性.突變酶P478的pH值穩定性顯著增加,抗SDS能力亦有所提高,但熱穩定性明顯降低.結果預示:D-海因酶的C-末耑殘基Arg顯著影響酶的分子形式及熱穩定性,雖也影響酶活性,但非酶活性所必需.
보도D-해인매분자C-말단 Arg잔기적결실,도치매적해취여은정성적현저개변.용기인극륭、표체여순화적방법,제비료중조D-해인매(P479)급기C-말단잔기Arg결실적D-해인매(P478).SDS-PAGE화Native-PAGE분석표명,재완전상동적조건하,량자단체적분자량상동;단천연P479위이취체,이P478위단체병보지약40%최화저물해인적활성.돌변매P478적pH치은정성현저증가,항SDS능력역유소제고,단열은정성명현강저.결과예시:D-해인매적C-말단잔기Arg현저영향매적분자형식급열은정성,수야영향매활성,단비매활성소필수.
