中国家禽
中國傢禽
중국가금
CHINA POULTRY
2009年
6期
8-11,15
,共5页
马德星%潘龙%杨静红%盖仁华%李广兴
馬德星%潘龍%楊靜紅%蓋仁華%李廣興
마덕성%반룡%양정홍%개인화%리엄흥
ChIL-15%转染%IFA
ChIL-15%轉染%IFA
ChIL-15%전염%IFA
应用反转录一聚合酶链式反应(RT-PCR)技术AkConA刺激20 h的白菜航鸡脾脏T淋巴细胞中扩增出鸡白细胞介素15(ChIL-15)全基因片段.将其连接到克隆载体pMD18-T中得到重组克隆质粒pMD18-T-ChIL-15.阳性克隆质粒经鉴定正确后将ChIL-15亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,得到重组阳性表达质粒pcDNA3.1(+)-ChIL-15.阳性表达质粒经鉴定正确后应用磷酸钙法体外转柒293T细胞,通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到了ChIL-15蛋白在293T细胞中的表达.
應用反轉錄一聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)技術AkConA刺激20 h的白菜航鷄脾髒T淋巴細胞中擴增齣鷄白細胞介素15(ChIL-15)全基因片段.將其連接到剋隆載體pMD18-T中得到重組剋隆質粒pMD18-T-ChIL-15.暘性剋隆質粒經鑒定正確後將ChIL-15亞剋隆入真覈錶達載體pcDNA3.1(+)中,得到重組暘性錶達質粒pcDNA3.1(+)-ChIL-15.暘性錶達質粒經鑒定正確後應用燐痠鈣法體外轉柒293T細胞,通過間接免疫熒光試驗(IFA)檢測到瞭ChIL-15蛋白在293T細胞中的錶達.
응용반전록일취합매련식반응(RT-PCR)기술AkConA자격20 h적백채항계비장T림파세포중확증출계백세포개소15(ChIL-15)전기인편단.장기련접도극륭재체pMD18-T중득도중조극륭질립pMD18-T-ChIL-15.양성극륭질립경감정정학후장ChIL-15아극륭입진핵표체재체pcDNA3.1(+)중,득도중조양성표체질립pcDNA3.1(+)-ChIL-15.양성표체질립경감정정학후응용린산개법체외전칠293T세포,통과간접면역형광시험(IFA)검측도료ChIL-15단백재293T세포중적표체.