江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2010年
1期
52-54
,共3页
CSFV%E2基因%基因克隆%重组pGAPZα
CSFV%E2基因%基因剋隆%重組pGAPZα
CSFV%E2기인%기인극륭%중조pGAPZα
从猪瘟弱毒活疫苗中提取猪瘟病毒(CSFV)RNA,采用RT-PCR技术,得到E2基因的cDNA,连接到pMD-18T载体上进行测序.将E2基因的cDNA及质粒pGAPZαA分别以内切酶KpnⅠ和EcoRⅠ进行顺序酶切,连接酶切产物并转化Escherichia coli DH5α.经过抗生素Zeocin筛选、PCR鉴定和重组质粒的酶切分析,将E2基因的测定序列与GenBank中的CSFV C株E2基因序列(序列号Z46258)比对,核苷酸同源性为99.46%;获得6个阳性重组子的克隆株.结果表明,重组质粒pGAPZα-E2中目的基因E2的核苷酸序列和大小、插入方向和位置是正确的.
從豬瘟弱毒活疫苗中提取豬瘟病毒(CSFV)RNA,採用RT-PCR技術,得到E2基因的cDNA,連接到pMD-18T載體上進行測序.將E2基因的cDNA及質粒pGAPZαA分彆以內切酶KpnⅠ和EcoRⅠ進行順序酶切,連接酶切產物併轉化Escherichia coli DH5α.經過抗生素Zeocin篩選、PCR鑒定和重組質粒的酶切分析,將E2基因的測定序列與GenBank中的CSFV C株E2基因序列(序列號Z46258)比對,覈苷痠同源性為99.46%;穫得6箇暘性重組子的剋隆株.結果錶明,重組質粒pGAPZα-E2中目的基因E2的覈苷痠序列和大小、插入方嚮和位置是正確的.
종저온약독활역묘중제취저온병독(CSFV)RNA,채용RT-PCR기술,득도E2기인적cDNA,련접도pMD-18T재체상진행측서.장E2기인적cDNA급질립pGAPZαA분별이내절매KpnⅠ화EcoRⅠ진행순서매절,련접매절산물병전화Escherichia coli DH5α.경과항생소Zeocin사선、PCR감정화중조질립적매절분석,장E2기인적측정서렬여GenBank중적CSFV C주E2기인서렬(서렬호Z46258)비대,핵감산동원성위99.46%;획득6개양성중조자적극륭주.결과표명,중조질립pGAPZα-E2중목적기인E2적핵감산서렬화대소、삽입방향화위치시정학적.
