绵羊Myostatin基因敲除载体的构建
면양Myostatin기인고제재체적구건
Construction of Sheep Myostatin Gene Targeting Vector
  • 万方数据
    生物技术通报 생물기술통보
    BIOTECHNOLOGY BULLETIN
    2011年 5期 93-97 ,共5页

    孙丹%金梅%杜立新%魏彩虹%张莉%路国彬%陆健%吕延飞

    손단%금매%두립신%위채홍%장리%로국빈%륙건%려연비

    绵羊%Myostatin基因%基因敲除%置换型敲除栽体 綿羊%Myostatin基因%基因敲除%置換型敲除栽體
    면양%Myostatin기인%기인고제%치환형고제재체
    根据Myostatin基因突变可导致肌肉量激增而产生"双肌"表型的特点,构建绵羊Myostatin基因置换型敲除栽体.利用LA-PCR技术成功地扩增得到绵羊Myostatin基因同源臂序列,其中同源长臂4.9kb,包括全部的exonl,intronl,exon2及部分启动子和大部分intron2;同源短臂1.1kb,包括部分exon3和31非翻译区序列,将二者连入PloxpⅡ正负筛选敲除骨架载体,利用骨架载体上Neo基因替代Myostatin基因的exon3,从而成功构建专门针对Myostatin第3外显子区域缺失的置换型敲除载体PloxpⅡ-OVIS-MSTN.酶切和测序鉴定证明载体构建正确,为后续获得绵羊Myostatin基因缺失型体细胞株奠定试验基础.
    근거Myostatin기인돌변가도치기육량격증이산생"쌍기"표형적특점,구건면양Myostatin기인치환형고제재체.이용LA-PCR기술성공지확증득도면양Myostatin기인동원비서렬,기중동원장비4.9kb,포괄전부적exonl,intronl,exon2급부분계동자화대부분intron2;동원단비1.1kb,포괄부분exon3화31비번역구서렬,장이자련입PloxpⅡ정부사선고제골가재체,이용골가재체상Neo기인체대Myostatin기인적exon3,종이성공구건전문침대Myostatin제3외현자구역결실적치환형고제재체PloxpⅡ-OVIS-MSTN.매절화측서감정증명재체구건정학,위후속획득면양Myostatin기인결실형체세포주전정시험기출.
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