重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2012年
18期
1799-1801,1804
,共4页
危志强%秦晓华%徐承云%邹宏昌%徐高四%占锦峰%涂卫平
危誌彊%秦曉華%徐承雲%鄒宏昌%徐高四%佔錦峰%塗衛平
위지강%진효화%서승운%추굉창%서고사%점금봉%도위평
螺内酯%肾小管%上皮细胞%细胞分化%转化生长因子β
螺內酯%腎小管%上皮細胞%細胞分化%轉化生長因子β
라내지%신소관%상피세포%세포분화%전화생장인자β
目的 探讨螺内酯对人清蛋白诱导的人近端肾小管上皮细胞(HK-2细胞)发生转分化的影响,以及该过程是否通过转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads信号通路发挥作用.方法 体外培养HK-2细胞,将其随机分为7组:A组(未加刺激物)、B组(加入10-7 mol/L 螺内酯)、C组(加入5 mg/mL清蛋白)、D组(加入5 mg/mL清蛋白及10-8 mol/L螺内酯)、E组(加入5 mg/mL清蛋白及10-7 mol/L 螺内酯)、F组(加入5 mg/mL清蛋白及10-6 mol/L 螺内酯)、G组(先加10 μmol/L TGF-β1拮抗剂,30 min后加入5 mg/mL 清蛋白).采用RT-PCR检测TGF-β1和整合素连接激酶(ILK)的mRNA表达;细胞免疫荧光检测上皮钙黏素(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;ELISA法检测纤维连接蛋白(FN)的蛋白水平.结果 C组ILK mRNA,α-SMA、FN蛋白较其他各组表达明显增高(P<0.05),E-cadherin蛋白表达明显下降(P<0.05),而TGF-β1 mRNA表达高于除G组以外其余各组(P<0.05).与G组相比,C组TGF-β1 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),而ILK mRNA,α-SMA、FN蛋白表达明显下降(P<0.05),E-cadherin表达明显升高(P<0.05).D、E、F组TGF-β1、ILKmRNA、α-SMA,FN蛋白表达逐渐下降,组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05);E-cadherin的表达逐渐增高(P<0.05).结论 一定浓度的清蛋白可以诱导体外培养的HK-2细胞发生转分化;螺内酯可抑制人清蛋白诱导HK-2细胞转分化作用,且呈剂量依赖性;TGF-β1/Smads信号通路可能是此过程中的重要通路.
目的 探討螺內酯對人清蛋白誘導的人近耑腎小管上皮細胞(HK-2細胞)髮生轉分化的影響,以及該過程是否通過轉化生長因子β1(TGF-β1)/Smads信號通路髮揮作用.方法 體外培養HK-2細胞,將其隨機分為7組:A組(未加刺激物)、B組(加入10-7 mol/L 螺內酯)、C組(加入5 mg/mL清蛋白)、D組(加入5 mg/mL清蛋白及10-8 mol/L螺內酯)、E組(加入5 mg/mL清蛋白及10-7 mol/L 螺內酯)、F組(加入5 mg/mL清蛋白及10-6 mol/L 螺內酯)、G組(先加10 μmol/L TGF-β1拮抗劑,30 min後加入5 mg/mL 清蛋白).採用RT-PCR檢測TGF-β1和整閤素連接激酶(ILK)的mRNA錶達;細胞免疫熒光檢測上皮鈣黏素(E-cadherin)、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的錶達;ELISA法檢測纖維連接蛋白(FN)的蛋白水平.結果 C組ILK mRNA,α-SMA、FN蛋白較其他各組錶達明顯增高(P<0.05),E-cadherin蛋白錶達明顯下降(P<0.05),而TGF-β1 mRNA錶達高于除G組以外其餘各組(P<0.05).與G組相比,C組TGF-β1 mRNA錶達差異無統計學意義(P>0.05),而ILK mRNA,α-SMA、FN蛋白錶達明顯下降(P<0.05),E-cadherin錶達明顯升高(P<0.05).D、E、F組TGF-β1、ILKmRNA、α-SMA,FN蛋白錶達逐漸下降,組間兩兩比較差異有統計學意義(P<0.05);E-cadherin的錶達逐漸增高(P<0.05).結論 一定濃度的清蛋白可以誘導體外培養的HK-2細胞髮生轉分化;螺內酯可抑製人清蛋白誘導HK-2細胞轉分化作用,且呈劑量依賴性;TGF-β1/Smads信號通路可能是此過程中的重要通路.
목적 탐토라내지대인청단백유도적인근단신소관상피세포(HK-2세포)발생전분화적영향,이급해과정시부통과전화생장인자β1(TGF-β1)/Smads신호통로발휘작용.방법 체외배양HK-2세포,장기수궤분위7조:A조(미가자격물)、B조(가입10-7 mol/L 라내지)、C조(가입5 mg/mL청단백)、D조(가입5 mg/mL청단백급10-8 mol/L라내지)、E조(가입5 mg/mL청단백급10-7 mol/L 라내지)、F조(가입5 mg/mL청단백급10-6 mol/L 라내지)、G조(선가10 μmol/L TGF-β1길항제,30 min후가입5 mg/mL 청단백).채용RT-PCR검측TGF-β1화정합소련접격매(ILK)적mRNA표체;세포면역형광검측상피개점소(E-cadherin)、α-평활기기동단백(α-SMA)적표체;ELISA법검측섬유련접단백(FN)적단백수평.결과 C조ILK mRNA,α-SMA、FN단백교기타각조표체명현증고(P<0.05),E-cadherin단백표체명현하강(P<0.05),이TGF-β1 mRNA표체고우제G조이외기여각조(P<0.05).여G조상비,C조TGF-β1 mRNA표체차이무통계학의의(P>0.05),이ILK mRNA,α-SMA、FN단백표체명현하강(P<0.05),E-cadherin표체명현승고(P<0.05).D、E、F조TGF-β1、ILKmRNA、α-SMA,FN단백표체축점하강,조간량량비교차이유통계학의의(P<0.05);E-cadherin적표체축점증고(P<0.05).결론 일정농도적청단백가이유도체외배양적HK-2세포발생전분화;라내지가억제인청단백유도HK-2세포전분화작용,차정제량의뢰성;TGF-β1/Smads신호통로가능시차과정중적중요통로.
