复旦学报(医学版)
複旦學報(醫學版)
복단학보(의학판)
JOURNAL OF FUDAN UNIVERSITY
2004年
1期
39-41
,共3页
华正豪%陈澍%张文宏%翁心华
華正豪%陳澍%張文宏%翁心華
화정호%진주%장문굉%옹심화
结核分枝杆菌%inhA基因%单链多态构象分析%多位点酶切
結覈分枝桿菌%inhA基因%單鏈多態構象分析%多位點酶切
결핵분지간균%inhA기인%단련다태구상분석%다위점매절
目的建立一种简便而有效的方法检测结核分枝杆菌异烟肼耐药基因inhA突变.方法收集结核杆菌临床菌株48株,其中异烟肼敏感株25株,耐药株23株.抽提临床菌株DNA和H37Rv标准株DNA,聚合酶链反应(PCR)方法扩增inhA基因,产物纯化后用限制性内切酶HaeⅡ酶切,酶切片段用单链多态构象分析(SS-CP)方法检测其单链构象.发现单链构象改变的PCR产物进行DNA测序.结果48株菌株中,25株敏感株中未见inhA基因单链构象差异,23株耐药株中inhA基因突变率为21.8%.新发现的错义突变有:A26E、R27K、V28A、Q32A、L54V和S72T.结论应用限制性内切酶HaeⅡ改良的聚合酶链反应一单链多态构象分析(PCR-SSCP)技术适用于结核临床菌株inhA基因突变的筛选.inhA基因突变位点呈多样性.
目的建立一種簡便而有效的方法檢測結覈分枝桿菌異煙肼耐藥基因inhA突變.方法收集結覈桿菌臨床菌株48株,其中異煙肼敏感株25株,耐藥株23株.抽提臨床菌株DNA和H37Rv標準株DNA,聚閤酶鏈反應(PCR)方法擴增inhA基因,產物純化後用限製性內切酶HaeⅡ酶切,酶切片段用單鏈多態構象分析(SS-CP)方法檢測其單鏈構象.髮現單鏈構象改變的PCR產物進行DNA測序.結果48株菌株中,25株敏感株中未見inhA基因單鏈構象差異,23株耐藥株中inhA基因突變率為21.8%.新髮現的錯義突變有:A26E、R27K、V28A、Q32A、L54V和S72T.結論應用限製性內切酶HaeⅡ改良的聚閤酶鏈反應一單鏈多態構象分析(PCR-SSCP)技術適用于結覈臨床菌株inhA基因突變的篩選.inhA基因突變位點呈多樣性.
목적건립일충간편이유효적방법검측결핵분지간균이연정내약기인inhA돌변.방법수집결핵간균림상균주48주,기중이연정민감주25주,내약주23주.추제림상균주DNA화H37Rv표준주DNA,취합매련반응(PCR)방법확증inhA기인,산물순화후용한제성내절매HaeⅡ매절,매절편단용단련다태구상분석(SS-CP)방법검측기단련구상.발현단련구상개변적PCR산물진행DNA측서.결과48주균주중,25주민감주중미견inhA기인단련구상차이,23주내약주중inhA기인돌변솔위21.8%.신발현적착의돌변유:A26E、R27K、V28A、Q32A、L54V화S72T.결론응용한제성내절매HaeⅡ개량적취합매련반응일단련다태구상분석(PCR-SSCP)기술괄용우결핵림상균주inhA기인돌변적사선.inhA기인돌변위점정다양성.
