CAJ | 학술논문

目的基因载体直接体内转移血管壁为血管病的治疗提供一种新方法,本研究探讨腺病毒载体介导外源基因转移至颅内血管的可行性.方法250μl含巨细胞病毒启动子的编码报告基因-绿色荧光蛋白(GFP)基因的复制缺陷型重组腺病毒载体(Ad5CMV5GFP),滴度为2.5×109pfu/ml,经枕大池穿刺法注入正常兔的脑池内.注入腺病毒载体后1～7d,采用荧光显微镜、免疫组织化学和逆转录聚合酶链式反应方法从形态学和分子生物学方面检测颅内血管和血管周围组织中外源基因GFP的表达情况.结果直接体内转染后1d,在颅内大血管如基底动脉的外膜可见外源基因的表达,3d时减弱,7d后消失,而血管中膜和内膜未见外源基因的表达;注入腺病毒载体后1～7d,外源基因可以有效转移至颅底软脑膜细胞,小血管外膜和平滑肌层也可见外源基因的表达;注入腺病毒载体后兔体温未见升高,但是脑脊液中的白细胞数明显升高,血管壁中可见炎性细胞浸润.结论经脑池内注入重组腺病毒载体可以将外源基因转移至正常兔颅内血管和软脑膜中,但是如何减轻腺病毒载体引起的炎症反应需进一步研究.
목적기인재체직접체내전이혈관벽위혈관병적치료제공일충신방법,본연구탐토선병독재체개도외원기인전이지로내혈관적가행성.방법250μl함거세포병독계동자적편마보고기인-록색형광단백(GFP)기인적복제결함형중조선병독재체(Ad5CMV5GFP),적도위2.5×109pfu/ml,경침대지천자법주입정상토적뇌지내.주입선병독재체후1～7d,채용형광현미경、면역조직화학화역전록취합매련식반응방법종형태학화분자생물학방면검측로내혈관화혈관주위조직중외원기인GFP적표체정황.결과직접체내전염후1d,재로내대혈관여기저동맥적외막가견외원기인적표체,3d시감약,7d후소실,이혈관중막화내막미견외원기인적표체;주입선병독재체후1～7d,외원기인가이유효전이지로저연뇌막세포,소혈관외막화평활기층야가견외원기인적표체;주입선병독재체후토체온미견승고,단시뇌척액중적백세포수명현승고,혈관벽중가견염성세포침윤.결론경뇌지내주입중조선병독재체가이장외원기인전이지정상토로내혈관화연뇌막중,단시여하감경선병독재체인기적염증반응수진일보연구.