CAJ | 학술논문

采用酶联免疫分析(ELISA)方法,根据构象变化后的蛋白与抗体结合能力下降从而导致ELISA测定值降低的原理,探测了转cry1Ab基因水稻表达的Cry1Ab蛋白在不同溶液介质中的热致构象变化行为,以及不同有机溶剂及溶液pH值对该蛋白构象变化的影响程度.实验表明,CrylAb蛋白在不同条件下的构象变化程度可以灵敏地通过ELISA方法检测.在不同的介质中,Cry1Ab蛋白的热致构象变化程度不同.在Na2SO4介质中,该蛋白具有较高的热稳定性;SDS的存在,可以促进该蛋白的构象变化.常温下,25%(V/V)的有机溶剂乙腈、异丙醇、甲醇、乙醇均能使该蛋白的构象发生转变,其中以乙腈最为显著.醇类溶剂对Cry1Ab蛋白的构象影响程度随疏水性增大而增大;溶液pH值也对该蛋白的构象变化产生影响.pH在 8～10之间,该蛋白构象能保持稳定;酸或过碱性的溶液均能使蛋白构象偏离原始状态,从而引起ELISA测定值的降低.另外,腐殖酸能在一定时间内保持Cry1Ab蛋白构象的稳定性.
채용매련면역분석(ELISA)방법,근거구상변화후적단백여항체결합능력하강종이도치ELISA측정치강저적원리,탐측료전cry1Ab기인수도표체적Cry1Ab단백재불동용액개질중적열치구상변화행위,이급불동유궤용제급용액pH치대해단백구상변화적영향정도.실험표명,CrylAb단백재불동조건하적구상변화정도가이령민지통과ELISA방법검측.재불동적개질중,Cry1Ab단백적열치구상변화정도불동.재Na2SO4개질중,해단백구유교고적열은정성;SDS적존재,가이촉진해단백적구상변화.상온하,25%(V/V)적유궤용제을정、이병순、갑순、을순균능사해단백적구상발생전변,기중이을정최위현저.순류용제대Cry1Ab단백적구상영향정도수소수성증대이증대;용액pH치야대해단백적구상변화산생영향.pH재 8～10지간,해단백구상능보지은정;산혹과감성적용액균능사단백구상편리원시상태,종이인기ELISA측정치적강저.령외,부식산능재일정시간내보지Cry1Ab단백구상적은정성.