浙江大学学报（医学版）
浙江大學學報（醫學版）
절강대학학보（의학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY MEDICAL SCIENCES
2006年
1期
39-44
,共6页
T-淋巴细胞%干扰素Ⅱ型%酶联免疫吸附测定
T-淋巴細胞%榦擾素Ⅱ型%酶聯免疫吸附測定
T-림파세포%간우소Ⅱ형%매련면역흡부측정
目的:对同种异体外周血单个核细胞(PBMNCs)刺激后分泌细胞因子的T淋巴细胞进行测定、富集和扩增,为研究介导同种异体反应的T淋巴细胞提供新的途径.方法:利用细胞因子分泌检测方法(CKSA),从单细胞水平定量测定人混合淋巴细胞反应中分泌干扰素-γ(IFN-γ)的T淋巴细胞;并对其进行磁性富集、扩增,再用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测其对原抗原的特异性.结果:同种异体PBMNCs刺激后检测到分泌IFN-γ的T淋巴细胞水平较对照组明显升高[(1.12±0.13)% vs (0.23±0.07)%,P<0.05],进一步富集达(67.3±10.5)%,相对倍数为(93.8±22.1)倍.经过富集的细胞能够通过OKT3、抗CD28单抗和IL-2组合,在21～28 d扩增>600倍,扩增后的细胞保留与原相关异基因刺激细胞特异性反应,并具分泌IFN-γ的能力.结论:利用CKSA从单细胞水平定量测定到显著升高的由同种异体PBMNCs刺激后分泌IFN-γ的T淋巴细胞.这些细胞可以被有效地富集和扩增,并保留针对原抗原的特异反应性.
目的:對同種異體外週血單箇覈細胞(PBMNCs)刺激後分泌細胞因子的T淋巴細胞進行測定、富集和擴增,為研究介導同種異體反應的T淋巴細胞提供新的途徑.方法:利用細胞因子分泌檢測方法(CKSA),從單細胞水平定量測定人混閤淋巴細胞反應中分泌榦擾素-γ(IFN-γ)的T淋巴細胞;併對其進行磁性富集、擴增,再用酶聯免疫斑點法(ELISPOT)檢測其對原抗原的特異性.結果:同種異體PBMNCs刺激後檢測到分泌IFN-γ的T淋巴細胞水平較對照組明顯升高[(1.12±0.13)% vs (0.23±0.07)%,P<0.05],進一步富集達(67.3±10.5)%,相對倍數為(93.8±22.1)倍.經過富集的細胞能夠通過OKT3、抗CD28單抗和IL-2組閤,在21～28 d擴增>600倍,擴增後的細胞保留與原相關異基因刺激細胞特異性反應,併具分泌IFN-γ的能力.結論:利用CKSA從單細胞水平定量測定到顯著升高的由同種異體PBMNCs刺激後分泌IFN-γ的T淋巴細胞.這些細胞可以被有效地富集和擴增,併保留針對原抗原的特異反應性.
목적:대동충이체외주혈단개핵세포(PBMNCs)자격후분비세포인자적T림파세포진행측정、부집화확증,위연구개도동충이체반응적T림파세포제공신적도경.방법:이용세포인자분비검측방법(CKSA),종단세포수평정량측정인혼합림파세포반응중분비간우소-γ(IFN-γ)적T림파세포;병대기진행자성부집、확증,재용매련면역반점법(ELISPOT)검측기대원항원적특이성.결과:동충이체PBMNCs자격후검측도분비IFN-γ적T림파세포수평교대조조명현승고[(1.12±0.13)% vs (0.23±0.07)%,P<0.05],진일보부집체(67.3±10.5)%,상대배수위(93.8±22.1)배.경과부집적세포능구통과OKT3、항CD28단항화IL-2조합,재21～28 d확증>600배,확증후적세포보류여원상관이기인자격세포특이성반응,병구분비IFN-γ적능력.결론:이용CKSA종단세포수평정량측정도현저승고적유동충이체PBMNCs자격후분비IFN-γ적T림파세포.저사세포가이피유효지부집화확증,병보류침대원항원적특이반응성.
