生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2007年
3期
306-311
,共6页
张臻峰%于佳%曹扣%黄熙泰
張臻峰%于佳%曹釦%黃熙泰
장진봉%우가%조구%황희태
超凝集DNA%大肠杆菌DM800%原子力显微镜%拓扑异构酶Ⅳ
超凝集DNA%大腸桿菌DM800%原子力顯微鏡%拓撲異構酶Ⅳ
초응집DNA%대장간균DM800%원자력현미경%탁복이구매Ⅳ
超凝集DNA是质粒DNA的一种特殊拓扑结构形式,最初在大肠杆菌SD108(topA+gyrB225)细胞中被发现.现在大肠杆菌DM800(topA-gyrB225)细胞中也发现了这种结构,这说明超凝集DNA的形成与细胞内旋转酶活性降低有直接关系,而与拓扑异构酶Ⅰ的存在与否无关.体外实验的结果显示,具有很强的正超螺旋松弛活性的拓扑异构酶Ⅳ可以将超凝集DNA完全松弛,这也证明质粒DNA的超凝集结构与超螺旋结构在细胞内是可以互变的.使用原子力显微镜对分离到的pBR322DNA超凝集结构进行分析,并与普通超螺旋进行比较,结果表明,超凝集DNA分子的结构发生了巨大的变化,其分子长度比正常超螺旋分子缩短了约30%,宽度和高度则增加了60%,结构更接近于A型DNA.另外,原子力显微镜研究结果表明,氯喹的嵌入并非改变了超凝集DNA的超螺旋状态,而是使其打结并最终压缩成一团.
超凝集DNA是質粒DNA的一種特殊拓撲結構形式,最初在大腸桿菌SD108(topA+gyrB225)細胞中被髮現.現在大腸桿菌DM800(topA-gyrB225)細胞中也髮現瞭這種結構,這說明超凝集DNA的形成與細胞內鏇轉酶活性降低有直接關繫,而與拓撲異構酶Ⅰ的存在與否無關.體外實驗的結果顯示,具有很彊的正超螺鏇鬆弛活性的拓撲異構酶Ⅳ可以將超凝集DNA完全鬆弛,這也證明質粒DNA的超凝集結構與超螺鏇結構在細胞內是可以互變的.使用原子力顯微鏡對分離到的pBR322DNA超凝集結構進行分析,併與普通超螺鏇進行比較,結果錶明,超凝集DNA分子的結構髮生瞭巨大的變化,其分子長度比正常超螺鏇分子縮短瞭約30%,寬度和高度則增加瞭60%,結構更接近于A型DNA.另外,原子力顯微鏡研究結果錶明,氯喹的嵌入併非改變瞭超凝集DNA的超螺鏇狀態,而是使其打結併最終壓縮成一糰.
초응집DNA시질립DNA적일충특수탁복결구형식,최초재대장간균SD108(topA+gyrB225)세포중피발현.현재대장간균DM800(topA-gyrB225)세포중야발현료저충결구,저설명초응집DNA적형성여세포내선전매활성강저유직접관계,이여탁복이구매Ⅰ적존재여부무관.체외실험적결과현시,구유흔강적정초라선송이활성적탁복이구매Ⅳ가이장초응집DNA완전송이,저야증명질립DNA적초응집결구여초라선결구재세포내시가이호변적.사용원자력현미경대분리도적pBR322DNA초응집결구진행분석,병여보통초라선진행비교,결과표명,초응집DNA분자적결구발생료거대적변화,기분자장도비정상초라선분자축단료약30%,관도화고도칙증가료60%,결구경접근우A형DNA.령외,원자력현미경연구결과표명,록규적감입병비개변료초응집DNA적초라선상태,이시사기타결병최종압축성일단.
