CAJ | 학술논문

目的探讨自然杀伤T细胞(NKT)对大鼠角膜移植免疫排斥反应的防治作用.设计实验性研究.研究对象 8只Fisher344大鼠为供体,16只Lewis大鼠为受体.方法无菌取Lewis大鼠脾脏中淋巴细胞,RPMI1640培养基体外培养三周后,流式细胞仪分选出NKT细胞(浓度5×104 /ml).取8只Fisher344大鼠为供体,16只Lewis大鼠为受体行穿透性角膜移植术.将受体大鼠随机分为治疗组和对照组,每组各8只.治疗组在手术结束时结膜下注射0.1ml上述浓度的NKT细胞,对照组注射相同体积生理盐水.术后观察记录植片的存活情况,术后第10天,每组2只大鼠取材,行组织病理学、免疫组织化学和流式细胞仪检测.主要指标角膜植片平均存活时间,组织病理学及免疫组织化学染色检查淋巴细胞浸润情况.结果对照组角膜植片平均存活时间为(8.00±1.58)天,NKT细胞治疗组为(26.00±1.34)天.组织病理学检查可见对照组大鼠角膜植片重度水肿,角膜基质纤维板层排列紊乱,大量炎性细胞浸润,新生血管长入植片.而治疗组植片仅表现为轻度水肿,少量炎性细胞浸润.免疫组织化学染色可见对照组植片中大量CD4+和CD8+淋巴细胞浸润,治疗组中仅见少量CD4+和CD8+淋巴细胞浸润.流式细胞仪检查结果表明在治疗组脾脏中NKT细胞为(3.90±0.32)%,明显高于对照组(1.85±0.21)%;外周血中治疗组NKT细胞为(1.34±0.12)%,对照组为(3.59±0.23)%.结论 NKT细胞结膜下注射可延长角膜移植片存活时间,为防治角膜移植免疫排斥反应提供新的思路.
목적 탐토자연살상T세포(NKT)대대서각막이식면역배척반응적방치작용.설계실험성연구.연구대상 8지Fisher344대서위공체,16지Lewis대서위수체.방법 무균취Lewis대서비장중림파세포,RPMI1640배양기체외배양삼주후,류식세포의분선출NKT세포(농도5×104 /ml).취8지Fisher344대서위공체,16지Lewis대서위수체행천투성각막이식술.장수체대서수궤분위치료조화대조조,매조각8지.치료조재수술결속시결막하주사0.1ml상술농도적NKT세포,대조조주사상동체적생리염수.술후관찰기록식편적존활정황,술후제10천,매조2지대서취재,행조직병이학、면역조직화학화류식세포의검측.주요지표각막식편평균존활시간,조직병이학급면역조직화학염색검사림파세포침윤정황.결과 대조조각막식편평균존활시간위(8.00±1.58)천,NKT세포치료조위(26.00±1.34)천.조직병이학검사가견대조조대서각막식편중도수종,각막기질섬유판층배렬문란,대량염성세포침윤,신생혈관장입식편.이치료조식편부표현위경도수종,소량염성세포침윤.면역조직화학염색가견대조조식편중대량CD4+화CD8+림파세포침윤,치료조중부견소량CD4+화CD8+림파세포침윤.류식세포의검사결과표명재치료조비장중NKT세포위(3.90±0.32)%,명현고우대조조(1.85±0.21)%;외주혈중치료조NKT세포위(1.34±0.12)%,대조조위(3.59±0.23)%.결론 NKT세포결막하주사가연장각막이식편존활시간,위방치각막이식면역배척반응제공신적사로.