免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2007年
4期
456-458,461
,共4页
猫过敏原白蛋白%克隆%表达%免疫学鉴定
貓過敏原白蛋白%剋隆%錶達%免疫學鑒定
묘과민원백단백%극륭%표체%면역학감정
目的 克隆、表达猫过敏原白蛋白(Fel d 2),并分析其过敏原活性.方法 提取猫肝脏总RNA,逆转录合成cDNA,采用适宜引物进行PCR扩增目的 基因,随后将其克隆到原核表达载体PET24a(+),在大肠杆菌中进行表达,镍亲和柱层析法提纯重组蛋白,Western blot检测其过敏原活性.结果 序列分析表明所克隆白蛋白的序列由1 752 bp组成,编码584个氨基酸,与Genebank上的基因序列(NM 001009961)同源性为99.9%.SDS-PAGE显示表达的重组白蛋白Mr65 000.免疫印迹表明重组白蛋白具有与猫过敏原过敏病人血清IgE结合活性.结论 表达的重组白蛋白具有与猫过敏患者血清IgE结合活性.
目的 剋隆、錶達貓過敏原白蛋白(Fel d 2),併分析其過敏原活性.方法 提取貓肝髒總RNA,逆轉錄閤成cDNA,採用適宜引物進行PCR擴增目的 基因,隨後將其剋隆到原覈錶達載體PET24a(+),在大腸桿菌中進行錶達,鎳親和柱層析法提純重組蛋白,Western blot檢測其過敏原活性.結果 序列分析錶明所剋隆白蛋白的序列由1 752 bp組成,編碼584箇氨基痠,與Genebank上的基因序列(NM 001009961)同源性為99.9%.SDS-PAGE顯示錶達的重組白蛋白Mr65 000.免疫印跡錶明重組白蛋白具有與貓過敏原過敏病人血清IgE結閤活性.結論 錶達的重組白蛋白具有與貓過敏患者血清IgE結閤活性.
목적 극륭、표체묘과민원백단백(Fel d 2),병분석기과민원활성.방법 제취묘간장총RNA,역전록합성cDNA,채용괄의인물진행PCR확증목적 기인,수후장기극륭도원핵표체재체PET24a(+),재대장간균중진행표체,얼친화주층석법제순중조단백,Western blot검측기과민원활성.결과 서렬분석표명소극륭백단백적서렬유1 752 bp조성,편마584개안기산,여Genebank상적기인서렬(NM 001009961)동원성위99.9%.SDS-PAGE현시표체적중조백단백Mr65 000.면역인적표명중조백단백구유여묘과민원과민병인혈청IgE결합활성.결론 표체적중조백단백구유여묘과민환자혈청IgE결합활성.
