中国感染控制杂志
中國感染控製雜誌
중국감염공제잡지
CHINESE JOURNAL OF INFECTION CONTROL
2009年
3期
155-159
,共5页
王鲁文%陈辉%褚小刚%严少南%龚作炯
王魯文%陳輝%褚小剛%嚴少南%龔作炯
왕로문%진휘%저소강%엄소남%공작형
载脂蛋白BmRNA编辑酶催化多肽样3G%干扰素-α%HepG2 2.2.15细胞%STAT-1%肝炎,乙型
載脂蛋白BmRNA編輯酶催化多肽樣3G%榦擾素-α%HepG2 2.2.15細胞%STAT-1%肝炎,乙型
재지단백BmRNA편집매최화다태양3G%간우소-α%HepG2 2.2.15세포%STAT-1%간염,을형
目的 探讨干扰素(IFN)-α刺激HepG2 2.2.15细胞后,对载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样3G(apolipoprotein B mRNA-editing enzyme catalytic polypeptide-like 3G,APOBEC3G)表达的影响,以及初步探讨Ja-nus激酶-信号传导和转录激活子(JAK-STAT)信号通道是否参与APOBEC3G基因转录调控.方法 对HepG22.2.15细胞给予不同剂量(0、1、101、102、103、104 U/mL)IFN-α刺激8 h时,以及10U/mL IFN-α刺激2、4、6、8、10、12 h时,收集细胞或培养上清液.应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测HepG2 2.2.15细胞APOBEC3G、STAT-1 mRNA及蛋白的表达水平.应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中乙型肝炎表面抗原与e抗原(HBsAg与HBeAg)水平,应用实时荧光定量PCP及RT-PCR分别检测上清液中HBV DNA水平以及细胞中HBV mRNA水平.结果 无IFN-α(O U/mL)刺激时,HepG2 2.2.15细胞APOBEC3G表达水平很低.随着IFN-α浓度的升高,APOBEC3G mRNA及蛋白水平逐步升高,IFN-α浓度为104U/mL时,APOBEC3G表达量最高,并且STAT-1分子mRNA及蛋白的表达量亦逐步升高,与APOBEC3G表达量呈现平行相关.随着IFN-α刺激时间的延长,APOBEC3G表达量明显升高,8 h时达到最高,其后逐渐下降.104 U/mL-α刺激8 h时,HepG2 2.2.15细胞培养上清液中HBsAg、HBeAg、HBV DNA及细胞中HBV mR-NA水平均明显低于无IFN-α刺激的HepG2 2.2.15细胞.结论 IFN-α能诱导HepG2 2.2.15细胞表达APO-BEC3G,在一定范围内,APOBEC3G的表达与IFN-α的剂量、作用时间呈正相关;IFN-α诱导APOBEC3G的表达可能是其发挥抗病毒作用的机制之一;IFN-α是否经JAK-STAT信号通道刺激APOBEC3G的表达,二者之间的关系及其机制尚待进一步研究.
目的 探討榦擾素(IFN)-α刺激HepG2 2.2.15細胞後,對載脂蛋白B mRNA編輯酶催化多肽樣3G(apolipoprotein B mRNA-editing enzyme catalytic polypeptide-like 3G,APOBEC3G)錶達的影響,以及初步探討Ja-nus激酶-信號傳導和轉錄激活子(JAK-STAT)信號通道是否參與APOBEC3G基因轉錄調控.方法 對HepG22.2.15細胞給予不同劑量(0、1、101、102、103、104 U/mL)IFN-α刺激8 h時,以及10U/mL IFN-α刺激2、4、6、8、10、12 h時,收集細胞或培養上清液.應用實時熒光定量逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)及Western blot檢測HepG2 2.2.15細胞APOBEC3G、STAT-1 mRNA及蛋白的錶達水平.應用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測細胞培養上清液中乙型肝炎錶麵抗原與e抗原(HBsAg與HBeAg)水平,應用實時熒光定量PCP及RT-PCR分彆檢測上清液中HBV DNA水平以及細胞中HBV mRNA水平.結果 無IFN-α(O U/mL)刺激時,HepG2 2.2.15細胞APOBEC3G錶達水平很低.隨著IFN-α濃度的升高,APOBEC3G mRNA及蛋白水平逐步升高,IFN-α濃度為104U/mL時,APOBEC3G錶達量最高,併且STAT-1分子mRNA及蛋白的錶達量亦逐步升高,與APOBEC3G錶達量呈現平行相關.隨著IFN-α刺激時間的延長,APOBEC3G錶達量明顯升高,8 h時達到最高,其後逐漸下降.104 U/mL-α刺激8 h時,HepG2 2.2.15細胞培養上清液中HBsAg、HBeAg、HBV DNA及細胞中HBV mR-NA水平均明顯低于無IFN-α刺激的HepG2 2.2.15細胞.結論 IFN-α能誘導HepG2 2.2.15細胞錶達APO-BEC3G,在一定範圍內,APOBEC3G的錶達與IFN-α的劑量、作用時間呈正相關;IFN-α誘導APOBEC3G的錶達可能是其髮揮抗病毒作用的機製之一;IFN-α是否經JAK-STAT信號通道刺激APOBEC3G的錶達,二者之間的關繫及其機製尚待進一步研究.
목적 탐토간우소(IFN)-α자격HepG2 2.2.15세포후,대재지단백B mRNA편집매최화다태양3G(apolipoprotein B mRNA-editing enzyme catalytic polypeptide-like 3G,APOBEC3G)표체적영향,이급초보탐토Ja-nus격매-신호전도화전록격활자(JAK-STAT)신호통도시부삼여APOBEC3G기인전록조공.방법 대HepG22.2.15세포급여불동제량(0、1、101、102、103、104 U/mL)IFN-α자격8 h시,이급10U/mL IFN-α자격2、4、6、8、10、12 h시,수집세포혹배양상청액.응용실시형광정량역전록취합매련반응(RT-PCR)급Western blot검측HepG2 2.2.15세포APOBEC3G、STAT-1 mRNA급단백적표체수평.응용매련면역흡부시험(ELISA)검측세포배양상청액중을형간염표면항원여e항원(HBsAg여HBeAg)수평,응용실시형광정량PCP급RT-PCR분별검측상청액중HBV DNA수평이급세포중HBV mRNA수평.결과 무IFN-α(O U/mL)자격시,HepG2 2.2.15세포APOBEC3G표체수평흔저.수착IFN-α농도적승고,APOBEC3G mRNA급단백수평축보승고,IFN-α농도위104U/mL시,APOBEC3G표체량최고,병차STAT-1분자mRNA급단백적표체량역축보승고,여APOBEC3G표체량정현평행상관.수착IFN-α자격시간적연장,APOBEC3G표체량명현승고,8 h시체도최고,기후축점하강.104 U/mL-α자격8 h시,HepG2 2.2.15세포배양상청액중HBsAg、HBeAg、HBV DNA급세포중HBV mR-NA수평균명현저우무IFN-α자격적HepG2 2.2.15세포.결론 IFN-α능유도HepG2 2.2.15세포표체APO-BEC3G,재일정범위내,APOBEC3G적표체여IFN-α적제량、작용시간정정상관;IFN-α유도APOBEC3G적표체가능시기발휘항병독작용적궤제지일;IFN-α시부경JAK-STAT신호통도자격APOBEC3G적표체,이자지간적관계급기궤제상대진일보연구.
