贵阳医学院学报
貴暘醫學院學報
귀양의학원학보
JOURNAL OF GUIYANG MEDICAL COLLEGE
2009年
3期
250-254
,共5页
罗娜%郭晟%杨承英%费蕾%吴胜昔%陈永文%吴玉章%郝飞
囉娜%郭晟%楊承英%費蕾%吳勝昔%陳永文%吳玉章%郝飛
라나%곽성%양승영%비뢰%오성석%진영문%오옥장%학비
BclGL基因%病毒%siRNA%T淋巴细胞%逆转录聚合酶链反应
BclGL基因%病毒%siRNA%T淋巴細胞%逆轉錄聚閤酶鏈反應
BclGL기인%병독%siRNA%T림파세포%역전록취합매련반응
目的:制备表达针对BclGL基因的siRNA逆转录病毒,研究其对体外培养Jurkat细胞中BclGL基因的沉默效应及Jurkat细胞增殖的影响.方法: 利用siRNA预测软件获取3条siRNA 编码序列,插入pSilencer 5.1-H1构建重组逆转录病毒siRNA表达质粒,脂质体法转染PT67细胞包装重组逆转录病毒pSilencer 5.1-H1-BclGL,体外感染Jurkat细胞,嘌呤霉素筛选病毒感染阳性细胞克隆,实时定量 PCR 及 Western 验证干扰效率;CCK-8法体外检测BclGL基因沉默后Jurkat细胞的增殖能力.结果: 酶切及测序结果证实,表达siRNA的逆转录病毒构建成功,重组病毒表达的siRNA能有效干扰Jurkat细胞内BclGL基因的表达;BclGL表达下调可增强Jurkat细胞的增殖能力ela.结论: 成功制备了表达人BclGL基因 siRNA的重组逆转录病毒,并证实其对Jurkat细胞的生长抑制效应.
目的:製備錶達針對BclGL基因的siRNA逆轉錄病毒,研究其對體外培養Jurkat細胞中BclGL基因的沉默效應及Jurkat細胞增殖的影響.方法: 利用siRNA預測軟件穫取3條siRNA 編碼序列,插入pSilencer 5.1-H1構建重組逆轉錄病毒siRNA錶達質粒,脂質體法轉染PT67細胞包裝重組逆轉錄病毒pSilencer 5.1-H1-BclGL,體外感染Jurkat細胞,嘌呤黴素篩選病毒感染暘性細胞剋隆,實時定量 PCR 及 Western 驗證榦擾效率;CCK-8法體外檢測BclGL基因沉默後Jurkat細胞的增殖能力.結果: 酶切及測序結果證實,錶達siRNA的逆轉錄病毒構建成功,重組病毒錶達的siRNA能有效榦擾Jurkat細胞內BclGL基因的錶達;BclGL錶達下調可增彊Jurkat細胞的增殖能力ela.結論: 成功製備瞭錶達人BclGL基因 siRNA的重組逆轉錄病毒,併證實其對Jurkat細胞的生長抑製效應.
목적:제비표체침대BclGL기인적siRNA역전록병독,연구기대체외배양Jurkat세포중BclGL기인적침묵효응급Jurkat세포증식적영향.방법: 이용siRNA예측연건획취3조siRNA 편마서렬,삽입pSilencer 5.1-H1구건중조역전록병독siRNA표체질립,지질체법전염PT67세포포장중조역전록병독pSilencer 5.1-H1-BclGL,체외감염Jurkat세포,표령매소사선병독감염양성세포극륭,실시정량 PCR 급 Western 험증간우효솔;CCK-8법체외검측BclGL기인침묵후Jurkat세포적증식능력.결과: 매절급측서결과증실,표체siRNA적역전록병독구건성공,중조병독표체적siRNA능유효간우Jurkat세포내BclGL기인적표체;BclGL표체하조가증강Jurkat세포적증식능력ela.결론: 성공제비료표체인BclGL기인 siRNA적중조역전록병독,병증실기대Jurkat세포적생장억제효응.
