三明学院学报
三明學院學報
삼명학원학보
JOURNAL OF SANMING COLLEGE
2009年
2期
199-202
,共4页
宋育红%张新文%叶祖禄%龚培灶
宋育紅%張新文%葉祖祿%龔培竈
송육홍%장신문%협조록%공배조
石杉科%DNA提取%RAPD%体系优化
石杉科%DNA提取%RAPD%體繫優化
석삼과%DNA제취%RAPD%체계우화
以石杉科新鲜植物为材料,应用改良的CTAB法提取其基因组DNA,通过单因子实验优化了RAPD的反应体系.在25 μL反应体系中,Mg2++2.0 mmol/L,dNTPs 0.3 mmol/L,模板DNA3ng/μL,随机引物0.21xmol/L,Taq DNA聚合酶1.25U.PCK循环程序为:94℃预变性5 min;然后94℃变性1 min,39℃退火1 min,72℃延伸1.5 min,36个循环;最后72℃延伸7 min,4℃保存.结果表明该体系具有良好的稳定性和重复性,可应用于石杉科植物系统分类,种的鉴定和遗传多样性研究.
以石杉科新鮮植物為材料,應用改良的CTAB法提取其基因組DNA,通過單因子實驗優化瞭RAPD的反應體繫.在25 μL反應體繫中,Mg2++2.0 mmol/L,dNTPs 0.3 mmol/L,模闆DNA3ng/μL,隨機引物0.21xmol/L,Taq DNA聚閤酶1.25U.PCK循環程序為:94℃預變性5 min;然後94℃變性1 min,39℃退火1 min,72℃延伸1.5 min,36箇循環;最後72℃延伸7 min,4℃保存.結果錶明該體繫具有良好的穩定性和重複性,可應用于石杉科植物繫統分類,種的鑒定和遺傳多樣性研究.
이석삼과신선식물위재료,응용개량적CTAB법제취기기인조DNA,통과단인자실험우화료RAPD적반응체계.재25 μL반응체계중,Mg2++2.0 mmol/L,dNTPs 0.3 mmol/L,모판DNA3ng/μL,수궤인물0.21xmol/L,Taq DNA취합매1.25U.PCK순배정서위:94℃예변성5 min;연후94℃변성1 min,39℃퇴화1 min,72℃연신1.5 min,36개순배;최후72℃연신7 min,4℃보존.결과표명해체계구유량호적은정성화중복성,가응용우석삼과식물계통분류,충적감정화유전다양성연구.