CAJ | 학술논문

目的:观察氟伐他汀对醛固酮(Ald)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)血清与糖皮质激素诱导蛋白激酶1(SGK1)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法:以大鼠系膜细胞为实验对象,分为:(1)对照组;(2)不同浓度及时间Ald组;(3)Ald(10-7 mol/L)+SPI(安体舒通10-9 mol/L)组;(4)Ald(10-7 mol/L)+LY294002(PI3K抑制剂20 μmol/L)组;(5) Ald(10-7 mol/L)+SB203580(P38MAPK抑制剂20 μmol/L);(6)Ald(10-7 mol/L)+F(氟伐他汀10-7、10-6、10-5 mol/L)组;(7) Ald(10-7 mol/L)+F(氟伐他汀10-5 mol/L)+ MVA(甲羟戊酸10-4 mol/L)组;(8) Ald(10-7 mol/L)+F(氟伐他汀10-5 mol/L)+ FPP(法尼酯焦磷酸 10-5 mol/L)组;(9)Ald(10-7 mol/L)+F(氟伐他汀10-5 mol/L)+ GGPP(焦磷酸牛儿基牛儿酯 10-5 mol/L)组.Western印迹方法检测SGK1、CTGF蛋白表达水平.酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养液中细胞外基质成分纤维连接蛋白(FN)、单核细胞趋化因子(MCP-1)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)蛋白含量.结果:Ald呈剂量依赖性上调SGK1和CTGF蛋白表达(P<0.05).醛固酮刺激6 h即可增加SGK1蛋白表达(P<0.05),12 h达高峰, CTGF蛋白水平呈时间依赖性增加.安体舒通和PI3K特异性抑制剂LY294002可阻断Ald对SGK1的激活作用(P<0.01).氟伐他汀可呈剂量依赖性下调Ald诱导的系膜细胞内SGK1和CTGF蛋白表达,以及其下游趋化因子MCP-1和 ICAM-1表达(P<0.05).甲羟戊酸和GGPP可逆转氟伐他汀的作用(P<0.05).结论:醛固酮可通过抑制盐皮质激素受体(MR)和PI3K信号转导通路诱导大鼠系膜细胞内SGK1和CTGF蛋白的表达,氟伐他汀可通过SGK1信号转导通路缓解Ald的致纤维化作用.甲羟戊酸可部分逆转氟伐他汀的作用,可能与甲羟戊酸通路中的Rho蛋白活化有关.
목적:관찰불벌타정대철고동(Ald)유도적대서신소구계막세포(HBZY-1)혈청여당피질격소유도단백격매1(SGK1)화결체조직생장인자(CTGF)표체적영향.방법:이대서계막세포위실험대상,분위:(1)대조조;(2)불동농도급시간Ald조;(3)Ald(10-7 mol/L)+SPI(안체서통10-9 mol/L)조;(4)Ald(10-7 mol/L)+LY294002(PI3K억제제20 μmol/L)조;(5) Ald(10-7 mol/L)+SB203580(P38MAPK억제제20 μmol/L);(6)Ald(10-7 mol/L)+F(불벌타정10-7、10-6、10-5 mol/L)조;(7) Ald(10-7 mol/L)+F(불벌타정10-5 mol/L)+ MVA(갑간무산10-4 mol/L)조;(8) Ald(10-7 mol/L)+F(불벌타정10-5 mol/L)+ FPP(법니지초린산 10-5 mol/L)조;(9)Ald(10-7 mol/L)+F(불벌타정10-5 mol/L)+ GGPP(초린산우인기우인지 10-5 mol/L)조.Western인적방법검측SGK1、CTGF단백표체수평.매련면역흡부실험(ELISA)검측세포배양액중세포외기질성분섬유련접단백(FN)、단핵세포추화인자(MCP-1)화세포간점부분자-1(ICAM-1)단백함량.결과:Ald정제량의뢰성상조SGK1화CTGF단백표체(P<0.05).철고동자격6 h즉가증가SGK1단백표체(P<0.05),12 h체고봉, CTGF단백수평정시간의뢰성증가.안체서통화PI3K특이성억제제LY294002가조단Ald대SGK1적격활작용(P<0.01).불벌타정가정제량의뢰성하조Ald유도적계막세포내SGK1화CTGF단백표체,이급기하유추화인자MCP-1화 ICAM-1표체(P<0.05).갑간무산화GGPP가역전불벌타정적작용(P<0.05).결론:철고동가통과억제염피질격소수체(MR)화PI3K신호전도통로유도대서계막세포내SGK1화CTGF단백적표체,불벌타정가통과SGK1신호전도통로완해Ald적치섬유화작용.갑간무산가부분역전불벌타정적작용,가능여갑간무산통로중적Rho단백활화유관.