实验动物与比较医学
實驗動物與比較醫學
실험동물여비교의학
LABORATORY ANIMAL AND COMPARATIVE MEDICINE
2010年
3期
174-179
,共6页
猪%树突状细胞%单核来源树突状细胞
豬%樹突狀細胞%單覈來源樹突狀細胞
저%수돌상세포%단핵래원수돌상세포
目的 探讨体外大量培养扩增猪外周血单核细胞来源DC(monocyte-derived DC,MoDC),对细胞表型,免疫学功能及生物学活性进行鉴定.方法提取猪外周血单核细胞(PBMC),经GM-CSF和IL-4诱导,体外培养5～8d,得到悬浮的MoDC,培养第5天加入浓度为1μg/ml的LPS诱导成熟.通过倒置相差显微镜下观察MoDC细胞形态,流式细胞术检测表面CD80/86,SLA-Ⅱ,CD172a等分子表达,BrdU法测定混合淋巴细胞培养MoDC对同种异体T细胞的刺激能力,ELISA法检测MLR上清液中IFN-γL-4水平.结果 IL-4/GM-CSF刺激猪PBMC,可以获得MoDC,其表型为CD1+CD14+CD172a+CD80/86+SLA-Ⅱ+,经LPS刺激后CD80,CD86,SLA-Ⅱ表达升高.结论 应用细胞因子诱导猪PBMC成功获得了MoDC,为今后进一步研究移植耐受诱导和应用于异种移植打下基础.
目的 探討體外大量培養擴增豬外週血單覈細胞來源DC(monocyte-derived DC,MoDC),對細胞錶型,免疫學功能及生物學活性進行鑒定.方法提取豬外週血單覈細胞(PBMC),經GM-CSF和IL-4誘導,體外培養5～8d,得到懸浮的MoDC,培養第5天加入濃度為1μg/ml的LPS誘導成熟.通過倒置相差顯微鏡下觀察MoDC細胞形態,流式細胞術檢測錶麵CD80/86,SLA-Ⅱ,CD172a等分子錶達,BrdU法測定混閤淋巴細胞培養MoDC對同種異體T細胞的刺激能力,ELISA法檢測MLR上清液中IFN-γL-4水平.結果 IL-4/GM-CSF刺激豬PBMC,可以穫得MoDC,其錶型為CD1+CD14+CD172a+CD80/86+SLA-Ⅱ+,經LPS刺激後CD80,CD86,SLA-Ⅱ錶達升高.結論 應用細胞因子誘導豬PBMC成功穫得瞭MoDC,為今後進一步研究移植耐受誘導和應用于異種移植打下基礎.
목적 탐토체외대량배양확증저외주혈단핵세포래원DC(monocyte-derived DC,MoDC),대세포표형,면역학공능급생물학활성진행감정.방법제취저외주혈단핵세포(PBMC),경GM-CSF화IL-4유도,체외배양5～8d,득도현부적MoDC,배양제5천가입농도위1μg/ml적LPS유도성숙.통과도치상차현미경하관찰MoDC세포형태,류식세포술검측표면CD80/86,SLA-Ⅱ,CD172a등분자표체,BrdU법측정혼합림파세포배양MoDC대동충이체T세포적자격능력,ELISA법검측MLR상청액중IFN-γL-4수평.결과 IL-4/GM-CSF자격저PBMC,가이획득MoDC,기표형위CD1+CD14+CD172a+CD80/86+SLA-Ⅱ+,경LPS자격후CD80,CD86,SLA-Ⅱ표체승고.결론 응용세포인자유도저PBMC성공획득료MoDC,위금후진일보연구이식내수유도화응용우이충이식타하기출.
