CAJ | 학술논문

目的:探讨转染maspin特异性短发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA)重组质粒对胃癌细胞株MKN-28凋亡的影响.方法:设计并合成针对maspin基因的shRNA,并将其与真核表达载体pGenesil-1.1连接,构建重组质粒pGenesil-maspin.应用RT-PCR和Western 印迹法检测转染重组质粒后MKN-28细胞中maspin、bcl-2和bax mRNA及蛋白的表达变化,应用FCM法检测转染重组质粒对MKN-28细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响.结果:成功构建maspin特异性shRNA重组质粒pGenesil-maspin1、pGenesil-maspin2及pGenesil-HK(阴性对照); pGenesil-maspin成功转染后可明显下调胃癌细胞MKN-28中 maspin和bax mRNA及蛋白的表达水平(P<0.01),并上调bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.01);重组质粒转染后,MKN-28细胞的细胞周期呈现G0/G1期细胞减少(P<0.01),细胞凋亡率下降(P<0.01).结论:外源性maspin shRNA转染MKN-28细胞后能下调maspin的表达,抑制胃癌细胞的凋亡,且使细胞周期分布发生改变;其分子机制可能与上调bcl-2和下调bax的表达有关.
목적:탐토전염maspin특이성단발협RNA(short hairpin RNA, shRNA)중조질립대위암세포주MKN-28조망적영향.방법:설계병합성침대maspin기인적shRNA,병장기여진핵표체재체pGenesil-1.1련접,구건중조질립pGenesil-maspin.응용RT-PCR화Western 인적법검측전염중조질립후MKN-28세포중maspin、bcl-2화bax mRNA급단백적표체변화,응용FCM법검측전염중조질립대MKN-28세포적세포주기화세포조망적영향.결과:성공구건maspin특이성shRNA중조질립pGenesil-maspin1、pGenesil-maspin2급pGenesil-HK(음성대조); pGenesil-maspin성공전염후가명현하조위암세포MKN-28중 maspin화bax mRNA급단백적표체수평(P<0.01),병상조bcl-2 mRNA화단백적표체수평(P<0.01);중조질립전염후,MKN-28세포적세포주기정현G0/G1기세포감소(P<0.01),세포조망솔하강(P<0.01).결론:외원성maspin shRNA전염MKN-28세포후능하조maspin적표체,억제위암세포적조망,차사세포주기분포발생개변;기분자궤제가능여상조bcl-2화하조bax적표체유관.