遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2010年
9期
961-965
,共5页
鲍永美%刘永惠%许冬清%黄骥%王州飞%王建飞%张红生
鮑永美%劉永惠%許鼕清%黃驥%王州飛%王建飛%張紅生
포영미%류영혜%허동청%황기%왕주비%왕건비%장홍생
水稻%Qb-SNARE蛋白%OsNPSN11%多克隆抗体%转基因表达分析
水稻%Qb-SNARE蛋白%OsNPSN11%多剋隆抗體%轉基因錶達分析
수도%Qb-SNARE단백%OsNPSN11%다극륭항체%전기인표체분석
在真核生物细胞囊泡运输过程中的膜融合主要是由SNARE蛋白介导的, OsNPSN11是从水稻中克隆的Qb-SNARE家族基因, 文章将OsNPSN11构建到原核表达载体pET-30a中与6个His标签融合, 重组质粒pET-OsNPSN11转化BL21(DE3)0.5 mmol/L IPTG诱导4 h后获得了高效表达.用镍离子亲和树脂(Ni2+-NTA His Bind Resin) 纯化融合蛋白, 以纯化后的蛋白为抗原免疫新西兰家兔制备多克隆抗体, Western blotting结果显示, 该抗体能特异识别在原核系统表达的抗原, 以及水稻不同组织质膜组分中的OsNPSN11, 可用于转基因水稻中目标蛋白的表达分析.
在真覈生物細胞囊泡運輸過程中的膜融閤主要是由SNARE蛋白介導的, OsNPSN11是從水稻中剋隆的Qb-SNARE傢族基因, 文章將OsNPSN11構建到原覈錶達載體pET-30a中與6箇His標籤融閤, 重組質粒pET-OsNPSN11轉化BL21(DE3)0.5 mmol/L IPTG誘導4 h後穫得瞭高效錶達.用鎳離子親和樹脂(Ni2+-NTA His Bind Resin) 純化融閤蛋白, 以純化後的蛋白為抗原免疫新西蘭傢兔製備多剋隆抗體, Western blotting結果顯示, 該抗體能特異識彆在原覈繫統錶達的抗原, 以及水稻不同組織質膜組分中的OsNPSN11, 可用于轉基因水稻中目標蛋白的錶達分析.
재진핵생물세포낭포운수과정중적막융합주요시유SNARE단백개도적, OsNPSN11시종수도중극륭적Qb-SNARE가족기인, 문장장OsNPSN11구건도원핵표체재체pET-30a중여6개His표첨융합, 중조질립pET-OsNPSN11전화BL21(DE3)0.5 mmol/L IPTG유도4 h후획득료고효표체.용얼리자친화수지(Ni2+-NTA His Bind Resin) 순화융합단백, 이순화후적단백위항원면역신서란가토제비다극륭항체, Western blotting결과현시, 해항체능특이식별재원핵계통표체적항원, 이급수도불동조직질막조분중적OsNPSN11, 가용우전기인수도중목표단백적표체분석.
