中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
3期
381-385
,共5页
透明质酸%骨髓间充质干细胞%软骨细胞%分化%细胞外基质
透明質痠%骨髓間充質榦細胞%軟骨細胞%分化%細胞外基質
투명질산%골수간충질간세포%연골세포%분화%세포외기질
背景:透明质酸是关节腔滑液最主要的成分,对细胞的形态发生起着非常重要的作用,但其用于软骨缺损修复时对骨髓间充质干细胞的影响如何呢?目的:通过分析外源性透明质酸对兔骨髓间充质干细胞体外增殖及定向分化为软骨细胞的影响,探讨关节腔内环境对骨髓间充质干细胞的作用.方法:全骨髓法+贴壁培养法分离培养兔骨髓间充质干细胞,取第4代细胞用于实验,实验组细胞加入透明质酸诱导液,以转化生长因子β3诱导组作为阳性对照,阴性对照组加入常规培养液.分别于诱导后第7,14,21 d行甲苯胺蓝染色检测蛋白聚糖表达,免疫组化染色及RT-PCR检测细胞Ⅱ型胶原表达.结果与结论:经透明质酸诱导后,细胞增殖速度减慢,由长梭形变为多角形、椭圆形,细胞外基质呈甲苯胺蓝异染性和Ⅱ型胶原免疫组化阳性,RT-PCR检测示Ⅱ型胶原mRNA表达阳性,表现出软骨细胞的分化特点,但表达均比阳性对照组弱.结果提示,外源性透明质酸具有诱导兔骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的能力,但比转化生长因子β3的诱导能力弱,关节腔内环境对骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化有正性促进作用,支持透明质酸作为软骨组织工程基质使用.
揹景:透明質痠是關節腔滑液最主要的成分,對細胞的形態髮生起著非常重要的作用,但其用于軟骨缺損脩複時對骨髓間充質榦細胞的影響如何呢?目的:通過分析外源性透明質痠對兔骨髓間充質榦細胞體外增殖及定嚮分化為軟骨細胞的影響,探討關節腔內環境對骨髓間充質榦細胞的作用.方法:全骨髓法+貼壁培養法分離培養兔骨髓間充質榦細胞,取第4代細胞用于實驗,實驗組細胞加入透明質痠誘導液,以轉化生長因子β3誘導組作為暘性對照,陰性對照組加入常規培養液.分彆于誘導後第7,14,21 d行甲苯胺藍染色檢測蛋白聚糖錶達,免疫組化染色及RT-PCR檢測細胞Ⅱ型膠原錶達.結果與結論:經透明質痠誘導後,細胞增殖速度減慢,由長梭形變為多角形、橢圓形,細胞外基質呈甲苯胺藍異染性和Ⅱ型膠原免疫組化暘性,RT-PCR檢測示Ⅱ型膠原mRNA錶達暘性,錶現齣軟骨細胞的分化特點,但錶達均比暘性對照組弱.結果提示,外源性透明質痠具有誘導兔骨髓間充質榦細胞嚮軟骨細胞分化的能力,但比轉化生長因子β3的誘導能力弱,關節腔內環境對骨髓間充質榦細胞嚮軟骨細胞分化有正性促進作用,支持透明質痠作為軟骨組織工程基質使用.
배경:투명질산시관절강활액최주요적성분,대세포적형태발생기착비상중요적작용,단기용우연골결손수복시대골수간충질간세포적영향여하니?목적:통과분석외원성투명질산대토골수간충질간세포체외증식급정향분화위연골세포적영향,탐토관절강내배경대골수간충질간세포적작용.방법:전골수법+첩벽배양법분리배양토골수간충질간세포,취제4대세포용우실험,실험조세포가입투명질산유도액,이전화생장인자β3유도조작위양성대조,음성대조조가입상규배양액.분별우유도후제7,14,21 d행갑분알람염색검측단백취당표체,면역조화염색급RT-PCR검측세포Ⅱ형효원표체.결과여결론:경투명질산유도후,세포증식속도감만,유장사형변위다각형、타원형,세포외기질정갑분알람이염성화Ⅱ형효원면역조화양성,RT-PCR검측시Ⅱ형효원mRNA표체양성,표현출연골세포적분화특점,단표체균비양성대조조약.결과제시,외원성투명질산구유유도토골수간충질간세포향연골세포분화적능력,단비전화생장인자β3적유도능력약,관절강내배경대골수간충질간세포향연골세포분화유정성촉진작용,지지투명질산작위연골조직공정기질사용.