医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2012年
3期
58-61
,共4页
陈健%仇容%毕艳丽%徐麟皓%沈香娣
陳健%仇容%畢豔麗%徐麟皓%瀋香娣
진건%구용%필염려%서린호%침향제
肺癌细胞%缺氧%凋亡%p-Akt%Survivin
肺癌細胞%缺氧%凋亡%p-Akt%Survivin
폐암세포%결양%조망%p-Akt%Survivin
目的 探讨二氯化钴( CoCl2)诱导人非小细胞肺癌A549细胞凋亡的作用机制.方法 应用不同浓度CoCl2作用A549细胞不同时间,建立化学性缺氧诱导细胞凋亡的实验模型；应用MTT法检测细胞生长抑制率；应用AO/EB荧光染色法检测细胞凋亡情况；应用Western blotting法检测总Akt( total - Akt)、磷酸化Akt(p - Akt)和survivin蛋白表达情况.结果 300、400 μmol/L CoCl2作用24、36、48h后A549细胞的生长受到不同程度的抑制,并呈现比较明显的剂量和时间依赖关系；通过荧光显微镜下能观察到细胞呈新月形、核质体绿色、染色质浓缩,呈现凋亡显著特征,200、300、400 μmol/L CoCl2处理24、48h后的细胞凋亡率显著高于对照组(P ＜0.01)；Western blotting检测结果显示300、400 μmol/L CoCl2作用48h后细胞内p- Akt、survivin蛋白表达量较对照组显著减少(P＜0.01),300μmol/L CoCl2作用36、48h较对照组能显著下调p- Akt、survivin蛋白表达量(P＜0.01),而总Akt蛋白表达量均无显著变化.结论 CoCl2可能是通过抑制p- Akt和survivin的蛋白表达,从而诱导A549细胞凋亡.
目的 探討二氯化鈷( CoCl2)誘導人非小細胞肺癌A549細胞凋亡的作用機製.方法 應用不同濃度CoCl2作用A549細胞不同時間,建立化學性缺氧誘導細胞凋亡的實驗模型；應用MTT法檢測細胞生長抑製率；應用AO/EB熒光染色法檢測細胞凋亡情況；應用Western blotting法檢測總Akt( total - Akt)、燐痠化Akt(p - Akt)和survivin蛋白錶達情況.結果 300、400 μmol/L CoCl2作用24、36、48h後A549細胞的生長受到不同程度的抑製,併呈現比較明顯的劑量和時間依賴關繫；通過熒光顯微鏡下能觀察到細胞呈新月形、覈質體綠色、染色質濃縮,呈現凋亡顯著特徵,200、300、400 μmol/L CoCl2處理24、48h後的細胞凋亡率顯著高于對照組(P ＜0.01)；Western blotting檢測結果顯示300、400 μmol/L CoCl2作用48h後細胞內p- Akt、survivin蛋白錶達量較對照組顯著減少(P＜0.01),300μmol/L CoCl2作用36、48h較對照組能顯著下調p- Akt、survivin蛋白錶達量(P＜0.01),而總Akt蛋白錶達量均無顯著變化.結論 CoCl2可能是通過抑製p- Akt和survivin的蛋白錶達,從而誘導A549細胞凋亡.
목적 탐토이록화고( CoCl2)유도인비소세포폐암A549세포조망적작용궤제.방법 응용불동농도CoCl2작용A549세포불동시간,건립화학성결양유도세포조망적실험모형；응용MTT법검측세포생장억제솔；응용AO/EB형광염색법검측세포조망정황；응용Western blotting법검측총Akt( total - Akt)、린산화Akt(p - Akt)화survivin단백표체정황.결과 300、400 μmol/L CoCl2작용24、36、48h후A549세포적생장수도불동정도적억제,병정현비교명현적제량화시간의뢰관계；통과형광현미경하능관찰도세포정신월형、핵질체록색、염색질농축,정현조망현저특정,200、300、400 μmol/L CoCl2처리24、48h후적세포조망솔현저고우대조조(P ＜0.01)；Western blotting검측결과현시300、400 μmol/L CoCl2작용48h후세포내p- Akt、survivin단백표체량교대조조현저감소(P＜0.01),300μmol/L CoCl2작용36、48h교대조조능현저하조p- Akt、survivin단백표체량(P＜0.01),이총Akt단백표체량균무현저변화.결론 CoCl2가능시통과억제p- Akt화survivin적단백표체,종이유도A549세포조망.
