中华肝脏病杂志
中華肝髒病雜誌
중화간장병잡지
CHINESE JOURNAL OF HEPATOLOGY
2010年
3期
213-216
,共4页
周静%孙伟%周洲%吴莹%向廷秀%姜政%陶小红%黄爱龙%王丕龙
週靜%孫偉%週洲%吳瑩%嚮廷秀%薑政%陶小紅%黃愛龍%王丕龍
주정%손위%주주%오형%향정수%강정%도소홍%황애룡%왕비룡
脂肪肝%脂联素%L02细胞
脂肪肝%脂聯素%L02細胞
지방간%지련소%L02세포
Fatty liver%Adiponectin%L02 cell
目的 观察携带人脂联素(AdipoQ)基因真核表达载体是否能在人正常肝细胞株L02中表达,并探讨其对体外诱导肝细胞脂肪变的预防作用及其意义,为AdipoQ在非酒精性脂肪肝病的基因治疗中奠定基础.方法 将构建含人AdipoQ重组载体pEGFP-N1-AdipoQ转染L02细胞(L02/pEGFP-N1-AdipoQ组,n=10),与pEGFP-N1空质粒转染L02细胞(L02/pEGFP-N1组,n=10)以及L02正常细胞株(L02组,n=10)为对照,分别加入浓度为20 μg/ml的油酸进行培养72h,用油红O染色观察细胞内脂滴,并检测细胞内甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)和甘油的含量.采用SAS8.2软件进行统计分析,3组之间总体差异的检验采用单因素方差分析,3组之间两两比较采用SNK-q检验.结果 含人AdipoQ重组载体pEGFP-N1-AdipoQ能够在L02细胞株中表达,油红O染色显示72 h L02组和L02/pEGFP-N1组分别比L02/pEGFP-N1-AdipoQ组脂肪变性更为明显.L02组,L02/pEGFP-N1组和L02/pEGFP-N1-AdipoQ组,TG含量分别为(89.23±18.45)μmol/L、(78.66±16.38)μmol/L和(26.58±7.65)μmol/L,FFA含量分别为(85.39±17.26)μmol/L、(75.63±12.25)μmol/L和(25.37±8.73)μmol/L,甘油含量分别为(62.29±13.59)μmol/L、(57.35±18.43)μmol/L和(15.37±7.53)μmol/L,F值分别为50.58、59.37、34.32,P值均<0.01.在L02/pEGFP-N1组中TG、FFA和甘油含量均明显高于L02/pEGFPN1-AdipoQ组,t值分别为7.81、8.50、6.75,P值均<0.01.在L02组中TG、FFA和甘油含量均显著高于L02/pEGFP-N1-AdipoQ组,t值分别为9.39、10.15、7.54,P值均<0.01.TG、FFA和甘油含量在L02/pEGFP-N1组和L02组之间,差异无统计学意义.结论 携带人脂联素基因真核表达载体能够在L02细胞株中表达,而且具有预防肝脂肪变性的作用.
目的 觀察攜帶人脂聯素(AdipoQ)基因真覈錶達載體是否能在人正常肝細胞株L02中錶達,併探討其對體外誘導肝細胞脂肪變的預防作用及其意義,為AdipoQ在非酒精性脂肪肝病的基因治療中奠定基礎.方法 將構建含人AdipoQ重組載體pEGFP-N1-AdipoQ轉染L02細胞(L02/pEGFP-N1-AdipoQ組,n=10),與pEGFP-N1空質粒轉染L02細胞(L02/pEGFP-N1組,n=10)以及L02正常細胞株(L02組,n=10)為對照,分彆加入濃度為20 μg/ml的油痠進行培養72h,用油紅O染色觀察細胞內脂滴,併檢測細胞內甘油三酯(TG)、遊離脂肪痠(FFA)和甘油的含量.採用SAS8.2軟件進行統計分析,3組之間總體差異的檢驗採用單因素方差分析,3組之間兩兩比較採用SNK-q檢驗.結果 含人AdipoQ重組載體pEGFP-N1-AdipoQ能夠在L02細胞株中錶達,油紅O染色顯示72 h L02組和L02/pEGFP-N1組分彆比L02/pEGFP-N1-AdipoQ組脂肪變性更為明顯.L02組,L02/pEGFP-N1組和L02/pEGFP-N1-AdipoQ組,TG含量分彆為(89.23±18.45)μmol/L、(78.66±16.38)μmol/L和(26.58±7.65)μmol/L,FFA含量分彆為(85.39±17.26)μmol/L、(75.63±12.25)μmol/L和(25.37±8.73)μmol/L,甘油含量分彆為(62.29±13.59)μmol/L、(57.35±18.43)μmol/L和(15.37±7.53)μmol/L,F值分彆為50.58、59.37、34.32,P值均<0.01.在L02/pEGFP-N1組中TG、FFA和甘油含量均明顯高于L02/pEGFPN1-AdipoQ組,t值分彆為7.81、8.50、6.75,P值均<0.01.在L02組中TG、FFA和甘油含量均顯著高于L02/pEGFP-N1-AdipoQ組,t值分彆為9.39、10.15、7.54,P值均<0.01.TG、FFA和甘油含量在L02/pEGFP-N1組和L02組之間,差異無統計學意義.結論 攜帶人脂聯素基因真覈錶達載體能夠在L02細胞株中錶達,而且具有預防肝脂肪變性的作用.
목적 관찰휴대인지련소(AdipoQ)기인진핵표체재체시부능재인정상간세포주L02중표체,병탐토기대체외유도간세포지방변적예방작용급기의의,위AdipoQ재비주정성지방간병적기인치료중전정기출.방법 장구건함인AdipoQ중조재체pEGFP-N1-AdipoQ전염L02세포(L02/pEGFP-N1-AdipoQ조,n=10),여pEGFP-N1공질립전염L02세포(L02/pEGFP-N1조,n=10)이급L02정상세포주(L02조,n=10)위대조,분별가입농도위20 μg/ml적유산진행배양72h,용유홍O염색관찰세포내지적,병검측세포내감유삼지(TG)、유리지방산(FFA)화감유적함량.채용SAS8.2연건진행통계분석,3조지간총체차이적검험채용단인소방차분석,3조지간량량비교채용SNK-q검험.결과 함인AdipoQ중조재체pEGFP-N1-AdipoQ능구재L02세포주중표체,유홍O염색현시72 h L02조화L02/pEGFP-N1조분별비L02/pEGFP-N1-AdipoQ조지방변성경위명현.L02조,L02/pEGFP-N1조화L02/pEGFP-N1-AdipoQ조,TG함량분별위(89.23±18.45)μmol/L、(78.66±16.38)μmol/L화(26.58±7.65)μmol/L,FFA함량분별위(85.39±17.26)μmol/L、(75.63±12.25)μmol/L화(25.37±8.73)μmol/L,감유함량분별위(62.29±13.59)μmol/L、(57.35±18.43)μmol/L화(15.37±7.53)μmol/L,F치분별위50.58、59.37、34.32,P치균<0.01.재L02/pEGFP-N1조중TG、FFA화감유함량균명현고우L02/pEGFPN1-AdipoQ조,t치분별위7.81、8.50、6.75,P치균<0.01.재L02조중TG、FFA화감유함량균현저고우L02/pEGFP-N1-AdipoQ조,t치분별위9.39、10.15、7.54,P치균<0.01.TG、FFA화감유함량재L02/pEGFP-N1조화L02조지간,차이무통계학의의.결론 휴대인지련소기인진핵표체재체능구재L02세포주중표체,이차구유예방간지방변성적작용.
Objective To investigate the effect of adiponectin on hepatoyte steatosis.Methods L02 cells were transfected with pEGFP-N1-AdipoQ,a plasmid encoding pEGFP-adiponectin fusion protein,or pEGFP-N1.Lipid droplets in the hepatocytes were observed by oil red staining at 72 h.The contents of TG,FFA and glycerol in hepatocytes were measured.Results Compared to cells transfected with pEGFP-N1AdipoQ plasimd,much more lipid droplets were observed in cells transfected with pEGFP-N1 plasmid.TG,FFA and glycerol contents in L02 cells and L02/pEGFP-N1 cells were significantly higher than those in L02/pEGFP-N1-AdipoQ cells.Conclusions Overexpression of adiponectin prevent hepatocyte steatosis.
