生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2000年
6期
655-657
,共3页
DNA改组%重聚 PCR%定向进化
DNA改組%重聚 PCR%定嚮進化
DNA개조%중취 PCR%정향진화
介绍了一个简便的DNA改组操作程序.首先利用PCR扩增了两段具有高度序列同源性的1 700 bp左右的基因片段,两者相比较同源性大于93%.然后将其等量混合后,在Mg2+存在的条件下,用DNaseⅠ切割成10~50 bp的小片段.这些小片段在不外加引物的前提下,利用PCR反应进行重聚,再将重聚物经过两轮正常的PCR扩增,获得了与原来片段大小相当的基因片段.这一技术有利于从一组序列同源性程度较高的基因库构建随机嵌合基因.
介紹瞭一箇簡便的DNA改組操作程序.首先利用PCR擴增瞭兩段具有高度序列同源性的1 700 bp左右的基因片段,兩者相比較同源性大于93%.然後將其等量混閤後,在Mg2+存在的條件下,用DNaseⅠ切割成10~50 bp的小片段.這些小片段在不外加引物的前提下,利用PCR反應進行重聚,再將重聚物經過兩輪正常的PCR擴增,穫得瞭與原來片段大小相噹的基因片段.這一技術有利于從一組序列同源性程度較高的基因庫構建隨機嵌閤基因.
개소료일개간편적DNA개조조작정서.수선이용PCR확증료량단구유고도서렬동원성적1 700 bp좌우적기인편단,량자상비교동원성대우93%.연후장기등량혼합후,재Mg2+존재적조건하,용DNaseⅠ절할성10~50 bp적소편단.저사소편단재불외가인물적전제하,이용PCR반응진행중취,재장중취물경과량륜정상적PCR확증,획득료여원래편단대소상당적기인편단.저일기술유리우종일조서렬동원성정도교고적기인고구건수궤감합기인.