中国寄生虫病防治杂志
中國寄生蟲病防治雜誌
중국기생충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF PARASITIC DISEASE CONTROL
2004年
1期
38-41
,共4页
陈利玉%易新元%曾宪芳%蔡春%章洁%MCREYNOLDS Larry
陳利玉%易新元%曾憲芳%蔡春%章潔%MCREYNOLDS Larry
진리옥%역신원%증헌방%채춘%장길%MCREYNOLDS Larry
血吸虫,日本%雌虫%cDNA文库%免疫筛选%序列分析
血吸蟲,日本%雌蟲%cDNA文庫%免疫篩選%序列分析
혈흡충,일본%자충%cDNA문고%면역사선%서렬분석
目的筛选日本血吸虫(Schistosoma japonicum, Sj)新的疫苗候选基因或雌虫性别特异性基因. 方法用Sj雌虫抗原免疫家兔制备血清,对Sj成虫cDNA文库进行免疫筛选,将阳性克隆的插入片段进行PCR扩增,采用Sanger双脱氧核苷酸末端终止法对阳性克隆插入子进行测序,与GeneBank中的已知序列进行比对分析. 结果共获得26个阳性克隆,其PCR产物大小约0.5~3 kb.在进行测序的8个阳性克隆中发现了GeneBank未报道的Sj肌球蛋白的部分基因序列(GeneBank登录号为AY322148)和1个新基因(命名为Sj-F1,GeneBank登录号为AY261995).Sj-F1编码的蛋白理论分子质量为13.45 ku,等电点为6.29,富含α螺旋和随机卷曲,含多个蛋白激酶磷酸化位点,1个酪氨酸激酶Ⅱ磷酸化位点和1个豆蔻酸位点. 结论 Sj雌虫免疫血清可识别Sj特异性抗原分子,该抗原基因是否为雌虫性别特异性基因及其作为日本血吸虫病疫苗候选基因的价值,有待进一步研究.
目的篩選日本血吸蟲(Schistosoma japonicum, Sj)新的疫苗候選基因或雌蟲性彆特異性基因. 方法用Sj雌蟲抗原免疫傢兔製備血清,對Sj成蟲cDNA文庫進行免疫篩選,將暘性剋隆的插入片段進行PCR擴增,採用Sanger雙脫氧覈苷痠末耑終止法對暘性剋隆插入子進行測序,與GeneBank中的已知序列進行比對分析. 結果共穫得26箇暘性剋隆,其PCR產物大小約0.5~3 kb.在進行測序的8箇暘性剋隆中髮現瞭GeneBank未報道的Sj肌毬蛋白的部分基因序列(GeneBank登錄號為AY322148)和1箇新基因(命名為Sj-F1,GeneBank登錄號為AY261995).Sj-F1編碼的蛋白理論分子質量為13.45 ku,等電點為6.29,富含α螺鏇和隨機捲麯,含多箇蛋白激酶燐痠化位點,1箇酪氨痠激酶Ⅱ燐痠化位點和1箇豆蔻痠位點. 結論 Sj雌蟲免疫血清可識彆Sj特異性抗原分子,該抗原基因是否為雌蟲性彆特異性基因及其作為日本血吸蟲病疫苗候選基因的價值,有待進一步研究.
목적사선일본혈흡충(Schistosoma japonicum, Sj)신적역묘후선기인혹자충성별특이성기인. 방법용Sj자충항원면역가토제비혈청,대Sj성충cDNA문고진행면역사선,장양성극륭적삽입편단진행PCR확증,채용Sanger쌍탈양핵감산말단종지법대양성극륭삽입자진행측서,여GeneBank중적이지서렬진행비대분석. 결과공획득26개양성극륭,기PCR산물대소약0.5~3 kb.재진행측서적8개양성극륭중발현료GeneBank미보도적Sj기구단백적부분기인서렬(GeneBank등록호위AY322148)화1개신기인(명명위Sj-F1,GeneBank등록호위AY261995).Sj-F1편마적단백이론분자질량위13.45 ku,등전점위6.29,부함α라선화수궤권곡,함다개단백격매린산화위점,1개락안산격매Ⅱ린산화위점화1개두구산위점. 결론 Sj자충면역혈청가식별Sj특이성항원분자,해항원기인시부위자충성별특이성기인급기작위일본혈흡충병역묘후선기인적개치,유대진일보연구.