CAJ | 학술논문

背景与目的:口腔洗液上皮细胞应用于检测基因多态性已有多篇文献报道,但口腔洗液中含有少量食物残渣是否给基因多态性检测带来干扰已备受关注.本研究比较口腔上皮细胞和血样品DNA中某些基因的多态性,同时以同样的方法检测食物中动植物组织的DNA,以排除食物残渣干扰实验结果的可能性,并探讨改良口腔洗液上皮细胞收集方法.方法:收集62例人口腔洗液,每例收集40ml,加10 ml异丙醇固定.其中30例进行细胞涂片检查上皮细胞含量,同时采集外周血5 ml.另采集人们常食用的米饭、青菜、毛豆、苹果、猪肉、牛肉、鸡肉、鸭肉.所有样品分别经蛋白酶K消化,酚氯仿抽提,乙醇沉淀提取基因组DNA.结合PCR-RFLP技术进行口腔细胞和血细胞基因多态性分析比较.并用Alu片段测定人口腔洗液、外周血及上述食物DNA.结果:62例口腔洗液DNA含量为(135.15±64.30)μg(22.36～330.70μg);其中30例经镜检含有人上皮细胞者有75%～95%,DNA含量为(143.44±61.64)μg(51.01～283.58μg);30例外周血中DNA含量为(91.19±38.01)μg(30.83～178.63μg).琼脂糖凝胶电泳结果显示:62例口腔上皮细胞和30例血样品均具有高分子量DNA,其中61例口腔细胞和30例血样品均能扩增βglobin、Alu以及NAT2、GSTM1、GSTT1、CYP1A 1和CYP2E1基因片段,但所有的食物DNA全部未能扩增.30例口腔洗液与相应血液的基因多态性结果一致.结论:口腔洗液DNA大部分来源于人,即使含有少量食物残渣也不会给基因多态性分析带来干扰,其基因多态性检测结果与血样品DNA分析结果完全一致.
배경여목적:구강세액상피세포응용우검측기인다태성이유다편문헌보도,단구강세액중함유소량식물잔사시부급기인다태성검측대래간우이비수관주.본연구비교구강상피세포화혈양품DNA중모사기인적다태성,동시이동양적방법검측식물중동식물조직적DNA,이배제식물잔사간우실험결과적가능성,병탐토개량구강세액상피세포수집방법.방법:수집62례인구강세액,매례수집40ml,가10 ml이병순고정.기중30례진행세포도편검사상피세포함량,동시채집외주혈5 ml.령채집인문상식용적미반、청채、모두、평과、저육、우육、계육、압육.소유양품분별경단백매K소화,분록방추제,을순침정제취기인조DNA.결합PCR-RFLP기술진행구강세포화혈세포기인다태성분석비교.병용Alu편단측정인구강세액、외주혈급상술식물DNA.결과:62례구강세액DNA함량위(135.15±64.30)μg(22.36～330.70μg);기중30례경경검함유인상피세포자유75%～95%,DNA함량위(143.44±61.64)μg(51.01～283.58μg);30예외주혈중DNA함량위(91.19±38.01)μg(30.83～178.63μg).경지당응효전영결과현시:62례구강상피세포화30례혈양품균구유고분자량DNA,기중61례구강세포화30례혈양품균능확증βglobin、Alu이급NAT2、GSTM1、GSTT1、CYP1A 1화CYP2E1기인편단,단소유적식물DNA전부미능확증.30례구강세액여상응혈액적기인다태성결과일치.결론:구강세액DNA대부분래원우인,즉사함유소량식물잔사야불회급기인다태성분석대래간우,기기인다태성검측결과여혈양품DNA분석결과완전일치.