CAJ | 학술논문

目的: 探讨抗前列腺癌多肽融合蛋白在大肠杆菌中的原核表达,为抗前列腺癌新药的研究奠定基础. 方法:通过BH3, K237, DG2结构域和能被PSA特异性水解的短肽序列设计多肽药物的氨基酸序列,并依据大肠杆菌的偏爱密码子反翻译成基因序列. 分段合成寡聚脱氧核糖核酸,经磷酸化、退火后,先后克隆至表达载体pGEX-4T-2的BamH I和EcoR I之间. 将经双酶切鉴定获得的阳性重组子进行DNA测序. 用IPTG诱导重组菌株表达并进行SDS-PAGE分析. 结果:pGEX 4T-2-APP216酶切鉴定可见约216 bp电泳条带,与设计长度相符. 测序结果证实pGEX 4T-2-APP216的基因序列与设计完全一致. SDS-PAGE分析表明该基因在原核细胞中获得高效融合表达,所得到蛋白分子质量与预测相符. 融合蛋白表达量约占菌体总蛋白的30%. 结论:通过抗前列腺癌多肽序列在大肠杆菌中的高效表达,为前列腺癌的治疗提供新的思路和方法.
목적: 탐토항전렬선암다태융합단백재대장간균중적원핵표체,위항전렬선암신약적연구전정기출. 방법:통과BH3, K237, DG2결구역화능피PSA특이성수해적단태서렬설계다태약물적안기산서렬,병의거대장간균적편애밀마자반번역성기인서렬. 분단합성과취탈양핵당핵산,경린산화、퇴화후,선후극륭지표체재체pGEX-4T-2적BamH I화EcoR I지간. 장경쌍매절감정획득적양성중조자진행DNA측서. 용IPTG유도중조균주표체병진행SDS-PAGE분석. 결과:pGEX 4T-2-APP216매절감정가견약216 bp전영조대,여설계장도상부. 측서결과증실pGEX 4T-2-APP216적기인서렬여설계완전일치. SDS-PAGE분석표명해기인재원핵세포중획득고효융합표체,소득도단백분자질량여예측상부. 융합단백표체량약점균체총단백적30%. 결론:통과항전렬선암다태서렬재대장간균중적고효표체,위전렬선암적치료제공신적사로화방법.