山东大学学报（医学版）
山東大學學報（醫學版）
산동대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2006年
12期
1197-1201
,共5页
秦宏伟%肖东杰%刘杰%胡安拉%马晓丽%汪运山%张红卫
秦宏偉%肖東傑%劉傑%鬍安拉%馬曉麗%汪運山%張紅衛
진굉위%초동걸%류걸%호안랍%마효려%왕운산%장홍위
内皮前体细胞%细胞培养%表面标志
內皮前體細胞%細胞培養%錶麵標誌
내피전체세포%세포배양%표면표지
目的:建立人外周血内皮前体细胞(EPCs)分离、诱导的方法,并利用流式细胞仪鉴定人内皮前体细胞的培养效果,为血管生成的细胞治疗研究奠定基础.方法:Ficoll密度梯度离心提取单个核细胞(MNCs),接种在人纤连蛋白包被的培养板上,培养于EGM-2MV中,4 d后,粘附细胞用Dil-AC-LDL和FITC-UEA-1染色,采用荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜观察.第4天到第7天,应用流式细胞仪动态检测粘附细胞表面标志CD34、CD31、KDR.结果:MNCs培养4 d后,荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜下可观察到Dil-AC-LDL和FITC-UEA-1双阳性的粘附细胞,流式细胞仪检测结果显示,CD34、CD31、KDR阳性细胞表达率分别为(2.50±1.47)%、(5.72±1.66)%、(36.24±3.24)%.第5、6和7天,CD34和CD31阳性细胞阳性率分别为(8.45±3.97)%、(22.52±3.86)%,(14.13±2.79)%、(42.76±3.67)%,(21.14±2.91)%、(54.67±3.44)%.结论:外周血中确实存在EPCs,并且在体外能被诱导分化为成熟的内皮细胞.
目的:建立人外週血內皮前體細胞(EPCs)分離、誘導的方法,併利用流式細胞儀鑒定人內皮前體細胞的培養效果,為血管生成的細胞治療研究奠定基礎.方法:Ficoll密度梯度離心提取單箇覈細胞(MNCs),接種在人纖連蛋白包被的培養闆上,培養于EGM-2MV中,4 d後,粘附細胞用Dil-AC-LDL和FITC-UEA-1染色,採用熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡觀察.第4天到第7天,應用流式細胞儀動態檢測粘附細胞錶麵標誌CD34、CD31、KDR.結果:MNCs培養4 d後,熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡下可觀察到Dil-AC-LDL和FITC-UEA-1雙暘性的粘附細胞,流式細胞儀檢測結果顯示,CD34、CD31、KDR暘性細胞錶達率分彆為(2.50±1.47)%、(5.72±1.66)%、(36.24±3.24)%.第5、6和7天,CD34和CD31暘性細胞暘性率分彆為(8.45±3.97)%、(22.52±3.86)%,(14.13±2.79)%、(42.76±3.67)%,(21.14±2.91)%、(54.67±3.44)%.結論:外週血中確實存在EPCs,併且在體外能被誘導分化為成熟的內皮細胞.
목적:건립인외주혈내피전체세포(EPCs)분리、유도적방법,병이용류식세포의감정인내피전체세포적배양효과,위혈관생성적세포치료연구전정기출.방법:Ficoll밀도제도리심제취단개핵세포(MNCs),접충재인섬련단백포피적배양판상,배양우EGM-2MV중,4 d후,점부세포용Dil-AC-LDL화FITC-UEA-1염색,채용형광현미경화공취초격광소묘현미경관찰.제4천도제7천,응용류식세포의동태검측점부세포표면표지CD34、CD31、KDR.결과:MNCs배양4 d후,형광현미경화공취초격광소묘현미경하가관찰도Dil-AC-LDL화FITC-UEA-1쌍양성적점부세포,류식세포의검측결과현시,CD34、CD31、KDR양성세포표체솔분별위(2.50±1.47)%、(5.72±1.66)%、(36.24±3.24)%.제5、6화7천,CD34화CD31양성세포양성솔분별위(8.45±3.97)%、(22.52±3.86)%,(14.13±2.79)%、(42.76±3.67)%,(21.14±2.91)%、(54.67±3.44)%.결론:외주혈중학실존재EPCs,병차재체외능피유도분화위성숙적내피세포.
