首都医科大学学报
首都醫科大學學報
수도의과대학학보
JOURNAL OF CAPITAL UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2009年
4期
500-503
,共4页
Notch信号%NTM%人胰腺癌%真核表达载体
Notch信號%NTM%人胰腺癌%真覈錶達載體
Notch신호%NTM%인이선암%진핵표체재체
目的 构建人源性Notch1跨膜段(notch1 transmembrane domain,NTM)真核表达载体pcDNA3-NTM,并观察其在真核细胞中的表达.方法 通过反转录-聚合酶链反应从人胰腺癌细胞系BxPC3细胞中获得编码Notch1跨膜段的cDNA,定向克隆至C端带flag蛋白标签序列的真核表达载体pcDNA3中,经酶切和测序鉴定正确后,应用脂质体法转染HeLa细胞,并通过蛋白免疫印迹法检测细胞内Notch1跨膜区的表达.结果 构建了真核表达载体pcDNA3-NTM,将其转染HeLa细胞48 h后,蛋白免疫印迹法检测到细胞内Notch1跨膜段的表达显著增高.结论 成功构建了真核表达载体pcDNA3-NTM,为研究Notch信号的活化机制及其在胰腺癌发生发展中的作用奠定了基础.
目的 構建人源性Notch1跨膜段(notch1 transmembrane domain,NTM)真覈錶達載體pcDNA3-NTM,併觀察其在真覈細胞中的錶達.方法 通過反轉錄-聚閤酶鏈反應從人胰腺癌細胞繫BxPC3細胞中穫得編碼Notch1跨膜段的cDNA,定嚮剋隆至C耑帶flag蛋白標籤序列的真覈錶達載體pcDNA3中,經酶切和測序鑒定正確後,應用脂質體法轉染HeLa細胞,併通過蛋白免疫印跡法檢測細胞內Notch1跨膜區的錶達.結果 構建瞭真覈錶達載體pcDNA3-NTM,將其轉染HeLa細胞48 h後,蛋白免疫印跡法檢測到細胞內Notch1跨膜段的錶達顯著增高.結論 成功構建瞭真覈錶達載體pcDNA3-NTM,為研究Notch信號的活化機製及其在胰腺癌髮生髮展中的作用奠定瞭基礎.
목적 구건인원성Notch1과막단(notch1 transmembrane domain,NTM)진핵표체재체pcDNA3-NTM,병관찰기재진핵세포중적표체.방법 통과반전록-취합매련반응종인이선암세포계BxPC3세포중획득편마Notch1과막단적cDNA,정향극륭지C단대flag단백표첨서렬적진핵표체재체pcDNA3중,경매절화측서감정정학후,응용지질체법전염HeLa세포,병통과단백면역인적법검측세포내Notch1과막구적표체.결과 구건료진핵표체재체pcDNA3-NTM,장기전염HeLa세포48 h후,단백면역인적법검측도세포내Notch1과막단적표체현저증고.결론 성공구건료진핵표체재체pcDNA3-NTM,위연구Notch신호적활화궤제급기재이선암발생발전중적작용전정료기출.
