农药学学报
農藥學學報
농약학학보
CHINESE JOURNAL OF PESTICIDE SCIENCE
2011年
2期
162-168
,共7页
许丽%初晓宇%田健%伍宁丰
許麗%初曉宇%田健%伍寧豐
허려%초효우%전건%오저봉
甲基对硫磷水解酶%文库构建%基因克隆%酶学性质
甲基對硫燐水解酶%文庫構建%基因剋隆%酶學性質
갑기대류린수해매%문고구건%기인극륭%매학성질
为了研究和分离有机磷降解酶及其编码基因,从农药厂污水处理池的活性污泥中分离出一株可以高效降解甲基对硫磷的细菌1-7,经16S rDNA鉴定为假单胞菌Pseudomonas sp..通过构建基因组文库的方法克隆了1-7的甲基对硫磷水解酶基因ophc3,该基因全长为975 bp,编码324个氨基酸,其中前24个氨基酸残基可能为信号肽序列.将其在大肠杆菌中表达,并对重组甲基对硫磷水解酶(OPHC3)进行纯化和酶学性质的研究结果表明,其酶促反应最适pH值为8.0,在pH 6.0～10.0的范围内放置30 min酶的相对活性均在70%以上;最适反应温度为45℃,但该酶不耐高温,60℃下保温10 min,相对活性降至46.77%.
為瞭研究和分離有機燐降解酶及其編碼基因,從農藥廠汙水處理池的活性汙泥中分離齣一株可以高效降解甲基對硫燐的細菌1-7,經16S rDNA鑒定為假單胞菌Pseudomonas sp..通過構建基因組文庫的方法剋隆瞭1-7的甲基對硫燐水解酶基因ophc3,該基因全長為975 bp,編碼324箇氨基痠,其中前24箇氨基痠殘基可能為信號肽序列.將其在大腸桿菌中錶達,併對重組甲基對硫燐水解酶(OPHC3)進行純化和酶學性質的研究結果錶明,其酶促反應最適pH值為8.0,在pH 6.0～10.0的範圍內放置30 min酶的相對活性均在70%以上;最適反應溫度為45℃,但該酶不耐高溫,60℃下保溫10 min,相對活性降至46.77%.
위료연구화분리유궤린강해매급기편마기인,종농약엄오수처리지적활성오니중분리출일주가이고효강해갑기대류린적세균1-7,경16S rDNA감정위가단포균Pseudomonas sp..통과구건기인조문고적방법극륭료1-7적갑기대류린수해매기인ophc3,해기인전장위975 bp,편마324개안기산,기중전24개안기산잔기가능위신호태서렬.장기재대장간균중표체,병대중조갑기대류린수해매(OPHC3)진행순화화매학성질적연구결과표명,기매촉반응최괄pH치위8.0,재pH 6.0～10.0적범위내방치30 min매적상대활성균재70%이상;최괄반응온도위45℃,단해매불내고온,60℃하보온10 min,상대활성강지46.77%.
