肝脏
肝髒
간장
CHINESE HEPATOLOGY
2012年
8期
554-557
,共4页
赵钢德%石翠翠%王晖%项晓刚%林兰意%郭清%俞红%谢青
趙鋼德%石翠翠%王暉%項曉剛%林蘭意%郭清%俞紅%謝青
조강덕%석취취%왕휘%항효강%림란의%곽청%유홍%사청
慢性乙型肝炎%干扰素%维甲酸诱导基因-Ⅰ%抗病毒免疫
慢性乙型肝炎%榦擾素%維甲痠誘導基因-Ⅰ%抗病毒免疫
만성을형간염%간우소%유갑산유도기인-Ⅰ%항병독면역
目的 探讨维甲酸诱导基因-Ⅰ(RIG-I)在诱导HBV感染IFN产生中的影响,以期对阐明乙型肝炎慢性化机制,寻找新的治疗靶点提供新的思路.方法 以RIG-I表达载体flagRIG-I-fult转染培养6孔板中的HepG2、HepG2.2.15,24 h后用水疱性口炎病毒(VSV)感染细胞,然后在0、8、16和24 h收集细胞及培养上清液,采用quantitive RTPCR、Western印迹检测RIG-I、MDA5、IPS-1、ISG54等基因的表达,ELISA检测培养上清液中分泌的IFN-β水平.结果 HepG2.2.15细胞在VSV感染后IFN-β分泌水平(11.18±1.34) pg/mL明显低于HepG2细胞(275.50±22.97) pg/mL (P＜0.01)；通过质粒flagRIG-I-ful1转染高表达RIG-I后,HepG2.2.15分泌IFN-β的能力恢复至(548.78±57.99) pg/mL 与HepG2细胞(532.10±39.34) pg/mL接近的水平(P=0.7013).结论 HepG2.2.15细胞感染VSV后IFN产生障碍,高表达RIG-I后IFN表达水平得到恢复,提示RIG-I功能缺陷导致抗病毒免疫应答降低,RIG-I可能在HBV感染清除中起重要作用.
目的 探討維甲痠誘導基因-Ⅰ(RIG-I)在誘導HBV感染IFN產生中的影響,以期對闡明乙型肝炎慢性化機製,尋找新的治療靶點提供新的思路.方法 以RIG-I錶達載體flagRIG-I-fult轉染培養6孔闆中的HepG2、HepG2.2.15,24 h後用水皰性口炎病毒(VSV)感染細胞,然後在0、8、16和24 h收集細胞及培養上清液,採用quantitive RTPCR、Western印跡檢測RIG-I、MDA5、IPS-1、ISG54等基因的錶達,ELISA檢測培養上清液中分泌的IFN-β水平.結果 HepG2.2.15細胞在VSV感染後IFN-β分泌水平(11.18±1.34) pg/mL明顯低于HepG2細胞(275.50±22.97) pg/mL (P＜0.01)；通過質粒flagRIG-I-ful1轉染高錶達RIG-I後,HepG2.2.15分泌IFN-β的能力恢複至(548.78±57.99) pg/mL 與HepG2細胞(532.10±39.34) pg/mL接近的水平(P=0.7013).結論 HepG2.2.15細胞感染VSV後IFN產生障礙,高錶達RIG-I後IFN錶達水平得到恢複,提示RIG-I功能缺陷導緻抗病毒免疫應答降低,RIG-I可能在HBV感染清除中起重要作用.
목적 탐토유갑산유도기인-Ⅰ(RIG-I)재유도HBV감염IFN산생중적영향,이기대천명을형간염만성화궤제,심조신적치료파점제공신적사로.방법 이RIG-I표체재체flagRIG-I-fult전염배양6공판중적HepG2、HepG2.2.15,24 h후용수포성구염병독(VSV)감염세포,연후재0、8、16화24 h수집세포급배양상청액,채용quantitive RTPCR、Western인적검측RIG-I、MDA5、IPS-1、ISG54등기인적표체,ELISA검측배양상청액중분비적IFN-β수평.결과 HepG2.2.15세포재VSV감염후IFN-β분비수평(11.18±1.34) pg/mL명현저우HepG2세포(275.50±22.97) pg/mL (P＜0.01)；통과질립flagRIG-I-ful1전염고표체RIG-I후,HepG2.2.15분비IFN-β적능력회복지(548.78±57.99) pg/mL 여HepG2세포(532.10±39.34) pg/mL접근적수평(P=0.7013).결론 HepG2.2.15세포감염VSV후IFN산생장애,고표체RIG-I후IFN표체수평득도회복,제시RIG-I공능결함도치항병독면역응답강저,RIG-I가능재HBV감염청제중기중요작용.
