中华血液学杂志
中華血液學雜誌
중화혈액학잡지
Chinese Journal of Hematology
2007年
12期
813-817
,共5页
王燏婵%赵玥铭%沈爱国%陆建新%张冬梅%何松%程纯
王燏嬋%趙玥銘%瀋愛國%陸建新%張鼕梅%何鬆%程純
왕율선%조모명%침애국%륙건신%장동매%하송%정순
细胞系,Jurkat%细胞系,Raji%p27kip1蛋白%激活蛋白1辅因子
細胞繫,Jurkat%細胞繫,Raji%p27kip1蛋白%激活蛋白1輔因子
세포계,Jurkat%세포계,Raji%p27kip1단백%격활단백1보인자
目的 探讨p27kip1及其出核相关分子激活蛋白1(AP-1)的辅助因子Jab1在淋巴瘤细胞中的表达变化及相互关系.方法 采用血清饥饿合并释放方法同步化处理淋巴瘤细胞系Jurkat和Raji细胞,分别采用Western blot及RT-PCR技术检测p27kip1、Jab1在淋巴瘤细胞中的蛋白表达水平和mRNA表达水平变化;采用来普霉素B(LMB)刺激增殖过程中的淋巴瘤细胞,检测p27kip1、Jab1的表达变化;构建人Jab1基因的pcDNA3.1-myc-Jab1的真核表达质粒,脂质体转染Jurkat细胞,配合免疫荧光技术检测p27kip1的亚细胞定位情况;免疫沉淀检测Jurkat和Raji细胞中p27kip1与Jab1的结合情况.结果 血清饥饿导致Jurkat和Raji细胞生长周期停滞,p27kip1蛋白总量增加,Jab1蛋白总量减少.血清释放后两者的蛋白水平呈现相反的表达变化,而p27kip1 mRNA水平无明显改变.LMB可以抑制由血清释放引起的细胞增殖,在此过程中p27kip1表达上调,Jab1表达下调.转染Jab1真核表达质粒的Jurkat细胞p27kip1定位有明显的改变.免疫沉淀结果显示在Jurkat和Raji细胞中p27kip1与Jab1相互结合.结论 Jab1可能通过与p27kip1结合来介导p27kip1的核内外分布并影响其表达,进而影响p27kip1的功能状态,从而参与调控淋巴瘤细胞的生长.
目的 探討p27kip1及其齣覈相關分子激活蛋白1(AP-1)的輔助因子Jab1在淋巴瘤細胞中的錶達變化及相互關繫.方法 採用血清饑餓閤併釋放方法同步化處理淋巴瘤細胞繫Jurkat和Raji細胞,分彆採用Western blot及RT-PCR技術檢測p27kip1、Jab1在淋巴瘤細胞中的蛋白錶達水平和mRNA錶達水平變化;採用來普黴素B(LMB)刺激增殖過程中的淋巴瘤細胞,檢測p27kip1、Jab1的錶達變化;構建人Jab1基因的pcDNA3.1-myc-Jab1的真覈錶達質粒,脂質體轉染Jurkat細胞,配閤免疫熒光技術檢測p27kip1的亞細胞定位情況;免疫沉澱檢測Jurkat和Raji細胞中p27kip1與Jab1的結閤情況.結果 血清饑餓導緻Jurkat和Raji細胞生長週期停滯,p27kip1蛋白總量增加,Jab1蛋白總量減少.血清釋放後兩者的蛋白水平呈現相反的錶達變化,而p27kip1 mRNA水平無明顯改變.LMB可以抑製由血清釋放引起的細胞增殖,在此過程中p27kip1錶達上調,Jab1錶達下調.轉染Jab1真覈錶達質粒的Jurkat細胞p27kip1定位有明顯的改變.免疫沉澱結果顯示在Jurkat和Raji細胞中p27kip1與Jab1相互結閤.結論 Jab1可能通過與p27kip1結閤來介導p27kip1的覈內外分佈併影響其錶達,進而影響p27kip1的功能狀態,從而參與調控淋巴瘤細胞的生長.
목적 탐토p27kip1급기출핵상관분자격활단백1(AP-1)적보조인자Jab1재림파류세포중적표체변화급상호관계.방법 채용혈청기아합병석방방법동보화처리림파류세포계Jurkat화Raji세포,분별채용Western blot급RT-PCR기술검측p27kip1、Jab1재림파류세포중적단백표체수평화mRNA표체수평변화;채용래보매소B(LMB)자격증식과정중적림파류세포,검측p27kip1、Jab1적표체변화;구건인Jab1기인적pcDNA3.1-myc-Jab1적진핵표체질립,지질체전염Jurkat세포,배합면역형광기술검측p27kip1적아세포정위정황;면역침정검측Jurkat화Raji세포중p27kip1여Jab1적결합정황.결과 혈청기아도치Jurkat화Raji세포생장주기정체,p27kip1단백총량증가,Jab1단백총량감소.혈청석방후량자적단백수평정현상반적표체변화,이p27kip1 mRNA수평무명현개변.LMB가이억제유혈청석방인기적세포증식,재차과정중p27kip1표체상조,Jab1표체하조.전염Jab1진핵표체질립적Jurkat세포p27kip1정위유명현적개변.면역침정결과현시재Jurkat화Raji세포중p27kip1여Jab1상호결합.결론 Jab1가능통과여p27kip1결합래개도p27kip1적핵내외분포병영향기표체,진이영향p27kip1적공능상태,종이삼여조공림파류세포적생장.
