细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2005年
6期
745-746
,共2页
刘加彬%汪道涌%孙明宽%徐敏%刘琍%谢维
劉加彬%汪道湧%孫明寬%徐敏%劉琍%謝維
류가빈%왕도용%손명관%서민%류리%사유
黑腹果蝇%ECP%单克隆抗体%抗原表位
黑腹果蠅%ECP%單剋隆抗體%抗原錶位
흑복과승%ECP%단극륭항체%항원표위
目的: 制备抗果蝇ECP蛋白的单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定.方法: 用大肠杆菌表达并纯化的GST-ECP融合蛋白, 免疫6～8 wk的雌性BALB/c小鼠, 取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合, 经间接ELISA筛选和克隆化培养制备杂交瘤细胞系.用间接ELISA及Western blot等方法对mAb的Ig亚类(型)、腹水效价及特异性进行鉴定.结果: 获得1株杂交瘤细胞株, 命名为8G9.Ig亚类(型)鉴定表明, 此株mAb为IgG1(κ型).腹水mAb的效价为 1∶ 1×105.Western blot分析表明, 该株mAb可与果蝇的幼虫、蛹及成虫组织中表达的ECP特异性结合, 可特异性的识别ECP抗原的231～300aa区段.结论: 获得1株能稳定分泌抗ECP mAb的细胞株, 为进一步研究ECP的功能奠定了基础.
目的: 製備抗果蠅ECP蛋白的單剋隆抗體(mAb)併進行特性鑒定.方法: 用大腸桿菌錶達併純化的GST-ECP融閤蛋白, 免疫6～8 wk的雌性BALB/c小鼠, 取其脾細胞與Sp2/0骨髓瘤細胞融閤, 經間接ELISA篩選和剋隆化培養製備雜交瘤細胞繫.用間接ELISA及Western blot等方法對mAb的Ig亞類(型)、腹水效價及特異性進行鑒定.結果: 穫得1株雜交瘤細胞株, 命名為8G9.Ig亞類(型)鑒定錶明, 此株mAb為IgG1(κ型).腹水mAb的效價為 1∶ 1×105.Western blot分析錶明, 該株mAb可與果蠅的幼蟲、蛹及成蟲組織中錶達的ECP特異性結閤, 可特異性的識彆ECP抗原的231～300aa區段.結論: 穫得1株能穩定分泌抗ECP mAb的細胞株, 為進一步研究ECP的功能奠定瞭基礎.
목적: 제비항과승ECP단백적단극륭항체(mAb)병진행특성감정.방법: 용대장간균표체병순화적GST-ECP융합단백, 면역6～8 wk적자성BALB/c소서, 취기비세포여Sp2/0골수류세포융합, 경간접ELISA사선화극륭화배양제비잡교류세포계.용간접ELISA급Western blot등방법대mAb적Ig아류(형)、복수효개급특이성진행감정.결과: 획득1주잡교류세포주, 명명위8G9.Ig아류(형)감정표명, 차주mAb위IgG1(κ형).복수mAb적효개위 1∶ 1×105.Western blot분석표명, 해주mAb가여과승적유충、용급성충조직중표체적ECP특이성결합, 가특이성적식별ECP항원적231～300aa구단.결론: 획득1주능은정분비항ECP mAb적세포주, 위진일보연구ECP적공능전정료기출.
