CAJ | 학술논문

目的探讨以人气管软骨细胞(HTC)为种子细胞在新型生物材料DegraPol泡沫支架上体外合成组织工程气管软骨的可行性.方法从肺移植供体(9例)取人气管软骨片段,胶原酶消化,将所获软骨细胞传代培养,将传代至6～8代的HTC种植到DegraPol支架上体外静态培养.种植前行Ⅱ型胶原免疫组织化学染色.于体外静态培养第2小时末和第3、7、21、42天取HTC-DegraPol复合物用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖活性;培养3周后取HTC-DegraPol复合物制备组织学检测标本行阿辛蓝染色观察硫酸软骨素分泌情况,并制备扫描电镜标本观察HTC在DegraPol支架中培养后的超微结构.结果 HTC在传代培养中显示稳定的增殖活性并分泌Ⅱ型胶原.种植到DegraPol支架中后培养2 h和3、7、21、42 d时MTT法测定的A值分别为0.112±0.004、0.151±0.021、0.170±0.035、0.176±0.023和0.213±0.023(每个时点n=4).培养21、42 d与培养2h比较,活性HTC数量差异均有统计学意义(P＜0.05).阿辛蓝染色显示HTC-DegraPol复合物的基质分泌硫酸软骨素,证实HTC-DegraPol复合物具有软骨样结构.扫描电镜观察显示新生软骨在DegraPol材料表面和中央均有形成,但以表面为主.结论 HTC可以在体外良好扩增并以多孔生物材料DegraPol为支架体外合成组织工程气管软骨,但培养条件应进一步优化.
목적 탐토이인기관연골세포(HTC)위충자세포재신형생물재료DegraPol포말지가상체외합성조직공정기관연골적가행성.방법 종폐이식공체(9례)취인기관연골편단,효원매소화,장소획연골세포전대배양,장전대지6～8대적HTC충식도DegraPol지가상체외정태배양.충식전행Ⅱ형효원면역조직화학염색.우체외정태배양제2소시말화제3、7、21、42천취HTC-DegraPol복합물용새서람(MTT)법측정세포증식활성;배양3주후취HTC-DegraPol복합물제비조직학검측표본행아신람염색관찰류산연골소분비정황,병제비소묘전경표본관찰HTC재DegraPol지가중배양후적초미결구.결과 HTC재전대배양중현시은정적증식활성병분비Ⅱ형효원.충식도DegraPol지가중후배양2 h화3、7、21、42 d시MTT법측정적A치분별위0.112±0.004、0.151±0.021、0.170±0.035、0.176±0.023화0.213±0.023(매개시점n=4).배양21、42 d여배양2h비교,활성HTC수량차이균유통계학의의(P＜0.05).아신람염색현시HTC-DegraPol복합물적기질분비류산연골소,증실HTC-DegraPol복합물구유연골양결구.소묘전경관찰현시신생연골재DegraPol재료표면화중앙균유형성,단이표면위주.결론 HTC가이재체외량호확증병이다공생물재료DegraPol위지가체외합성조직공정기관연골,단배양조건응진일보우화.