CAJ | 학술논문

目的探讨经亚硒酸钠(Na2SeO3,Se)处理、K562细胞裂解物(又称为抗原细胞裂解物:ACL)冲击致敏的外周血单个核细胞(PBMNC)衍生的树突状细胞(DCs)体外诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤白血病细胞的能力.方法 1)DCs培养:用含3种细胞因子重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM CSF)、重组人白细胞介素 4(rhIL 4)和肿瘤坏死因子(TNF α)的RPMI 1640(10% FBS)培养体系,培养健康人的PBMNC 4 d,收获贴壁细胞;2)DCs分4组:Ⅰ组:单独DC培养组;Ⅱ组:加入0.5 μmol/L Se的DC组;Ⅲ组:加入ACL的DC组;Ⅳ组:同时加入0.5 μmol/L Se和ACL的DC组;3)效应细胞 CTL的诱导培养:用含细胞因子IL 2 的1640(10% FBS)培养体系,将非贴壁细胞(淋巴细胞)作为效应细胞,单独或与各组DC共同孵育5 d;4)CTL活性测定:用乳酸脱氢酶(LDH)释放试验,靶细胞为K562细胞.结果效应细胞与K562细胞按不同效靶比混合培养时,DC Ⅳ组、Ⅲ组及Ⅱ组刺激后的T细胞比DC Ⅰ组刺激后的T细胞及单纯T细胞对K562细胞的杀伤作用更显著,杀伤率随效靶比的增加而增加.其中E∶ T=25∶ 1时,T细胞组及T DC Ⅰ、T DC Ⅱ、T DC Ⅲ、T DC Ⅳ组对K562细胞的杀伤率分别为:5.9%±2.4%、15.3%±2.3%、26.3%±3.7%、28.2%±4.5%、36.2%±3.7%.T DC Ⅳ组杀伤活性高于其他各组(P值均<0.01).结论用含GM CSF、IL 4和TNF α的体外培养体系可从健康人PBMNC获得成熟的DCs,小剂量亚硒酸钠和K562细胞裂解液负载均可诱导出特异性杀伤靶细胞的CTL,且两者具有协同作用.
목적 탐토경아서산납(Na2SeO3,Se)처리、K562세포렬해물(우칭위항원세포렬해물:ACL)충격치민적외주혈단개핵세포(PBMNC)연생적수돌상세포(DCs)체외유도세포독성T림파세포(CTL)살상백혈병세포적능력.방법 1)DCs배양:용함3충세포인자중조인립세포거서세포집락자격인자(rhGM CSF)、중조인백세포개소 4(rhIL 4)화종류배사인자(TNF α)적RPMI 1640(10% FBS)배양체계,배양건강인적PBMNC 4 d,수획첩벽세포;2)DCs분4조:Ⅰ조:단독DC배양조;Ⅱ조:가입0.5 μmol/L Se적DC조;Ⅲ조:가입ACL적DC조;Ⅳ조:동시가입0.5 μmol/L Se화ACL적DC조;3)효응세포 CTL적유도배양:용함세포인자IL 2 적1640(10% FBS)배양체계,장비첩벽세포(림파세포)작위효응세포,단독혹여각조DC공동부육5 d;4)CTL활성측정:용유산탈경매(LDH)석방시험,파세포위K562세포.결과 효응세포여K562세포안불동효파비혼합배양시,DC Ⅳ조、Ⅲ조급Ⅱ조자격후적T세포비DC Ⅰ조자격후적T세포급단순T세포대K562세포적살상작용경현저,살상솔수효파비적증가이증가.기중E∶ T=25∶ 1시,T세포조급T DC Ⅰ、T DC Ⅱ、T DC Ⅲ、T DC Ⅳ조대K562세포적살상솔분별위:5.9%±2.4%、15.3%±2.3%、26.3%±3.7%、28.2%±4.5%、36.2%±3.7%.T DC Ⅳ조살상활성고우기타각조(P치균<0.01).결론 용함GM CSF、IL 4화TNF α적체외배양체계가종건강인PBMNC획득성숙적DCs,소제량아서산납화K562세포렬해액부재균가유도출특이성살상파세포적CTL,차량자구유협동작용.