南京农业大学学报
南京農業大學學報
남경농업대학학보
JOURNAL OF NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY
2009年
2期
92-96
,共5页
颜世敢%朱丽萍%张玉忠%周百成%张秀美%李雁冰
顏世敢%硃麗萍%張玉忠%週百成%張秀美%李雁冰
안세감%주려평%장옥충%주백성%장수미%리안빙
R-藻红蛋白%荧光标记%固相免疫荧光检测%禽流感病毒
R-藻紅蛋白%熒光標記%固相免疫熒光檢測%禽流感病毒
R-조홍단백%형광표기%고상면역형광검측%금류감병독
用适宜摩尔浓度的异型双功能交联剂SPDP将R-藻红蛋白与纯化的禽流感病毒H9亚型多克隆抗体交联,并经高效液相色谱纯化制备R-藻红蛋白标记抗体荧光探针.以溴化氰活化的琼脂糖微球为固相载体,采用双抗体夹心法建立固相免疫荧光检测法,以制备的R-藻红蛋白标记抗体荧光探针检测禽流感病毒H9尿囊毒.结果表明,阳性微球在蓝、绿光激发下发射桔黄色荧光,荧光明亮,无背景光干扰,特异性好,灵敏度高,可检测蛋白浓度为1.85×10-5 mg·mL-1的H9亚型尿囊毒.R-藻红蛋白标记探针的检测灵敏度高于FITC标记探针,R-藻红蛋白可替代FITC或与FITC等荧光染料一起用于多色荧光免疫检测.
用適宜摩爾濃度的異型雙功能交聯劑SPDP將R-藻紅蛋白與純化的禽流感病毒H9亞型多剋隆抗體交聯,併經高效液相色譜純化製備R-藻紅蛋白標記抗體熒光探針.以溴化氰活化的瓊脂糖微毬為固相載體,採用雙抗體夾心法建立固相免疫熒光檢測法,以製備的R-藻紅蛋白標記抗體熒光探針檢測禽流感病毒H9尿囊毒.結果錶明,暘性微毬在藍、綠光激髮下髮射桔黃色熒光,熒光明亮,無揹景光榦擾,特異性好,靈敏度高,可檢測蛋白濃度為1.85×10-5 mg·mL-1的H9亞型尿囊毒.R-藻紅蛋白標記探針的檢測靈敏度高于FITC標記探針,R-藻紅蛋白可替代FITC或與FITC等熒光染料一起用于多色熒光免疫檢測.
용괄의마이농도적이형쌍공능교련제SPDP장R-조홍단백여순화적금류감병독H9아형다극륭항체교련,병경고효액상색보순화제비R-조홍단백표기항체형광탐침.이추화청활화적경지당미구위고상재체,채용쌍항체협심법건립고상면역형광검측법,이제비적R-조홍단백표기항체형광탐침검측금류감병독H9뇨낭독.결과표명,양성미구재람、록광격발하발사길황색형광,형광명량,무배경광간우,특이성호,령민도고,가검측단백농도위1.85×10-5 mg·mL-1적H9아형뇨낭독.R-조홍단백표기탐침적검측령민도고우FITC표기탐침,R-조홍단백가체대FITC혹여FITC등형광염료일기용우다색형광면역검측.
