西安交通大学学报（医学版）
西安交通大學學報（醫學版）
서안교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2009年
4期
435-441
,共7页
乳腺癌%蛋白质组学%顺序抽提%双向电泳%基质辅助激光解吸离子化电离飞行时间质谱%三羟基异黄酮
乳腺癌%蛋白質組學%順序抽提%雙嚮電泳%基質輔助激光解吸離子化電離飛行時間質譜%三羥基異黃酮
유선암%단백질조학%순서추제%쌍향전영%기질보조격광해흡리자화전리비행시간질보%삼간기이황동
目的 初步研究低浓度的三羟异黄酮对人乳腺癌细胞系MCF-7的生长抑制作用,并通过蛋白质组学方法探讨其分子机制.方法 MCF-7细胞在含25μmol/L三羟异黄酮的培养液中分别培养1～7d后,进行MTT实验,测得生长曲线;采用顺序抽提的方法将细胞总蛋白分级为水溶性和疏水性两个组分,并应用双向电泳方法对其进行分离,以获取蛋白质的表达谱;通过软件分析,找出表达量存在显著差异的蛋白质点;再应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)与生物信息学相结合的方法对差异表达蛋白点进行分析鉴定.结果 25μmol/L的三羟异黄酮对MCF-7细胞具有明显的抑制作用,并在4d后观察到细胞凋亡现象的出现;双向电泳图谱分析表明无论是水溶性蛋白质还是疏水性蛋白都取得了很好的分离,并成功鉴定出24种差异表达蛋白,其中5种下调,19种上调.结论 这些蛋白质的功能涉及了细胞的生长调节、应激反应、形态和凋亡等多个方面.
目的 初步研究低濃度的三羥異黃酮對人乳腺癌細胞繫MCF-7的生長抑製作用,併通過蛋白質組學方法探討其分子機製.方法 MCF-7細胞在含25μmol/L三羥異黃酮的培養液中分彆培養1～7d後,進行MTT實驗,測得生長麯線;採用順序抽提的方法將細胞總蛋白分級為水溶性和疏水性兩箇組分,併應用雙嚮電泳方法對其進行分離,以穫取蛋白質的錶達譜;通過軟件分析,找齣錶達量存在顯著差異的蛋白質點;再應用基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)與生物信息學相結閤的方法對差異錶達蛋白點進行分析鑒定.結果 25μmol/L的三羥異黃酮對MCF-7細胞具有明顯的抑製作用,併在4d後觀察到細胞凋亡現象的齣現;雙嚮電泳圖譜分析錶明無論是水溶性蛋白質還是疏水性蛋白都取得瞭很好的分離,併成功鑒定齣24種差異錶達蛋白,其中5種下調,19種上調.結論 這些蛋白質的功能涉及瞭細胞的生長調節、應激反應、形態和凋亡等多箇方麵.
목적 초보연구저농도적삼간이황동대인유선암세포계MCF-7적생장억제작용,병통과단백질조학방법탐토기분자궤제.방법 MCF-7세포재함25μmol/L삼간이황동적배양액중분별배양1～7d후,진행MTT실험,측득생장곡선;채용순서추제적방법장세포총단백분급위수용성화소수성량개조분,병응용쌍향전영방법대기진행분리,이획취단백질적표체보;통과연건분석,조출표체량존재현저차이적단백질점;재응용기질보조격광해흡전리비행시간질보(MALDI-TOF-MS)여생물신식학상결합적방법대차이표체단백점진행분석감정.결과 25μmol/L적삼간이황동대MCF-7세포구유명현적억제작용,병재4d후관찰도세포조망현상적출현;쌍향전영도보분석표명무론시수용성단백질환시소수성단백도취득료흔호적분리,병성공감정출24충차이표체단백,기중5충하조,19충상조.결론 저사단백질적공능섭급료세포적생장조절、응격반응、형태화조망등다개방면.
