中国美容整形外科杂志
中國美容整形外科雜誌
중국미용정형외과잡지
CHINESE JOURNAL OF AESTHETIC AND PLASTIC SURGERY
2009年
11期
697-701
,共5页
皮肤%冻存-解冻%毛囊%干细胞
皮膚%凍存-解凍%毛囊%榦細胞
피부%동존-해동%모낭%간세포
目的 观察皮肤组织经不同冻存-解冻法处理后,分离的毛囊干细胞的生长状况,寻找较好的组织冻存方案,为解决无法短期收集足量标本而不能有效获取毛囊干细胞的问题提供实验方法参考.方法 获取大鼠有两撮触须的上唇,经不同方法处理后,分离毛囊隆突部细胞.设立对照组:新鲜标本;实验组1:未加冻存保护剂-70℃冻存24 h;实验组2:4℃保存24 h;实验组3:1.4 moL/L.乙二醇作为冻存保护剂-70℃冻存24 h;实验组4:1.4 mol/L DMSO作为冻存保护剂-70℃冻存24 h;实验组5:1.4 tool/L DMSO作为冻存保护剂-70℃冻存3个月;实验组6:0.7 mol/L DMSO作为冻存保护剂-70℃冻存24 h;冻存各组降温速率为0.5℃/min.其中3～6组分别采用单用培养基漂洗快速复苏法和蔗糖+培养基漂洗快速复苏法做对比.比较经以上6种方法处理后分离的毛囊隆突部细胞的活力和贴壁、增殖情况.结果 经冻存+单用培养基漂洗快速复苏法,4℃处理组获得的平均细胞活力为90.38%±4.62%,明显高于其他处理组(P值均＜0.05),仅次于对照组94.00%±5.64%.1.4moL/L DMSO作为冻存保护剂无论冻存24h或3个月均可取得较高的细胞活力(56.00%±3.91%和47.25%±3.55%),明显高于其他处理组(P值均＜0.05).组3～组6经单用培养基漂洗快速复苏法和蔗糖+培养基漂洗快速复苏法复苏所得平均细胞活力分别是25.63%±2.32%和27.25%±2.56%、56.00%±3.51%和54.88%±4.03%、47.25%±3.01%和44.00%±2.98%、27.88%±2.20%和26.75%±2.26%,差异均不显著(P值均＞0.05).各组毛囊干细胞生物学特性(贴壁、增殖等能力)与细胞活力呈相关趋势.结论 皮肤组织在4℃条件短期内可保持原代培养细胞的活力;皮肤组织以1.4 M DMSO为冻存剂-70℃条件下保存可较长时间保持细胞活力,较适合小鼠皮肤组织的保存,为毛囊干细胞的进一步研究提供技术支持.
目的 觀察皮膚組織經不同凍存-解凍法處理後,分離的毛囊榦細胞的生長狀況,尋找較好的組織凍存方案,為解決無法短期收集足量標本而不能有效穫取毛囊榦細胞的問題提供實驗方法參攷.方法 穫取大鼠有兩撮觸鬚的上脣,經不同方法處理後,分離毛囊隆突部細胞.設立對照組:新鮮標本;實驗組1:未加凍存保護劑-70℃凍存24 h;實驗組2:4℃保存24 h;實驗組3:1.4 moL/L.乙二醇作為凍存保護劑-70℃凍存24 h;實驗組4:1.4 mol/L DMSO作為凍存保護劑-70℃凍存24 h;實驗組5:1.4 tool/L DMSO作為凍存保護劑-70℃凍存3箇月;實驗組6:0.7 mol/L DMSO作為凍存保護劑-70℃凍存24 h;凍存各組降溫速率為0.5℃/min.其中3～6組分彆採用單用培養基漂洗快速複囌法和蔗糖+培養基漂洗快速複囌法做對比.比較經以上6種方法處理後分離的毛囊隆突部細胞的活力和貼壁、增殖情況.結果 經凍存+單用培養基漂洗快速複囌法,4℃處理組穫得的平均細胞活力為90.38%±4.62%,明顯高于其他處理組(P值均＜0.05),僅次于對照組94.00%±5.64%.1.4moL/L DMSO作為凍存保護劑無論凍存24h或3箇月均可取得較高的細胞活力(56.00%±3.91%和47.25%±3.55%),明顯高于其他處理組(P值均＜0.05).組3～組6經單用培養基漂洗快速複囌法和蔗糖+培養基漂洗快速複囌法複囌所得平均細胞活力分彆是25.63%±2.32%和27.25%±2.56%、56.00%±3.51%和54.88%±4.03%、47.25%±3.01%和44.00%±2.98%、27.88%±2.20%和26.75%±2.26%,差異均不顯著(P值均＞0.05).各組毛囊榦細胞生物學特性(貼壁、增殖等能力)與細胞活力呈相關趨勢.結論 皮膚組織在4℃條件短期內可保持原代培養細胞的活力;皮膚組織以1.4 M DMSO為凍存劑-70℃條件下保存可較長時間保持細胞活力,較適閤小鼠皮膚組織的保存,為毛囊榦細胞的進一步研究提供技術支持.
목적 관찰피부조직경불동동존-해동법처리후,분리적모낭간세포적생장상황,심조교호적조직동존방안,위해결무법단기수집족량표본이불능유효획취모낭간세포적문제제공실험방법삼고.방법 획취대서유량촬촉수적상진,경불동방법처리후,분리모낭륭돌부세포.설립대조조:신선표본;실험조1:미가동존보호제-70℃동존24 h;실험조2:4℃보존24 h;실험조3:1.4 moL/L.을이순작위동존보호제-70℃동존24 h;실험조4:1.4 mol/L DMSO작위동존보호제-70℃동존24 h;실험조5:1.4 tool/L DMSO작위동존보호제-70℃동존3개월;실험조6:0.7 mol/L DMSO작위동존보호제-70℃동존24 h;동존각조강온속솔위0.5℃/min.기중3～6조분별채용단용배양기표세쾌속복소법화자당+배양기표세쾌속복소법주대비.비교경이상6충방법처리후분리적모낭륭돌부세포적활력화첩벽、증식정황.결과 경동존+단용배양기표세쾌속복소법,4℃처리조획득적평균세포활력위90.38%±4.62%,명현고우기타처리조(P치균＜0.05),부차우대조조94.00%±5.64%.1.4moL/L DMSO작위동존보호제무론동존24h혹3개월균가취득교고적세포활력(56.00%±3.91%화47.25%±3.55%),명현고우기타처리조(P치균＜0.05).조3～조6경단용배양기표세쾌속복소법화자당+배양기표세쾌속복소법복소소득평균세포활력분별시25.63%±2.32%화27.25%±2.56%、56.00%±3.51%화54.88%±4.03%、47.25%±3.01%화44.00%±2.98%、27.88%±2.20%화26.75%±2.26%,차이균불현저(P치균＞0.05).각조모낭간세포생물학특성(첩벽、증식등능력)여세포활력정상관추세.결론 피부조직재4℃조건단기내가보지원대배양세포적활력;피부조직이1.4 M DMSO위동존제-70℃조건하보존가교장시간보지세포활력,교괄합소서피부조직적보존,위모낭간세포적진일보연구제공기술지지.
