重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2010年
6期
881-884
,共4页
刘丹丹%符州%田代印%杨琴%王莉佳
劉丹丹%符州%田代印%楊琴%王莉佳
류단단%부주%전대인%양금%왕리가
STAT6基因%STAT6蛋白%RNA干扰(RNA interference,RNAi)%shRNA%哮喘
STAT6基因%STAT6蛋白%RNA榦擾(RNA interference,RNAi)%shRNA%哮喘
STAT6기인%STAT6단백%RNA간우(RNA interference,RNAi)%shRNA%효천
目的:构建针对信号转导子和转录激活子6(Singnal transducers and activators of transcription 6,STAT6)基因的干扰质粒,并观察其对STAT6蛋白表达的抑制效果.方法:将构建的短发夹干扰质粒(Short hairpin RNA,shRNA)表达载体,与合成的pIRES2-EGFP-STAT6基因表达质粒共同转染COS7细胞,荧光显微镜下观察干扰效果,并利用Western blot观察蛋白表达的变化.结果:将pIRES2-EGFP-STAT6重组载体转染COS7细胞后,结果显示STAT6蛋白可以在细胞中高水平表达;与阴性对照组相比,STAT6 shRNA-1干扰组和STAT6 shRNA-2干扰组STAT6蛋白表达水平分别是23.1%和9.6%.结论:成功构建并筛选到具有显著干扰效率的STAT6干扰质粒,为哮喘的基因治疗研究奠定了基础.
目的:構建針對信號轉導子和轉錄激活子6(Singnal transducers and activators of transcription 6,STAT6)基因的榦擾質粒,併觀察其對STAT6蛋白錶達的抑製效果.方法:將構建的短髮夾榦擾質粒(Short hairpin RNA,shRNA)錶達載體,與閤成的pIRES2-EGFP-STAT6基因錶達質粒共同轉染COS7細胞,熒光顯微鏡下觀察榦擾效果,併利用Western blot觀察蛋白錶達的變化.結果:將pIRES2-EGFP-STAT6重組載體轉染COS7細胞後,結果顯示STAT6蛋白可以在細胞中高水平錶達;與陰性對照組相比,STAT6 shRNA-1榦擾組和STAT6 shRNA-2榦擾組STAT6蛋白錶達水平分彆是23.1%和9.6%.結論:成功構建併篩選到具有顯著榦擾效率的STAT6榦擾質粒,為哮喘的基因治療研究奠定瞭基礎.
목적:구건침대신호전도자화전록격활자6(Singnal transducers and activators of transcription 6,STAT6)기인적간우질립,병관찰기대STAT6단백표체적억제효과.방법:장구건적단발협간우질립(Short hairpin RNA,shRNA)표체재체,여합성적pIRES2-EGFP-STAT6기인표체질립공동전염COS7세포,형광현미경하관찰간우효과,병이용Western blot관찰단백표체적변화.결과:장pIRES2-EGFP-STAT6중조재체전염COS7세포후,결과현시STAT6단백가이재세포중고수평표체;여음성대조조상비,STAT6 shRNA-1간우조화STAT6 shRNA-2간우조STAT6단백표체수평분별시23.1%화9.6%.결론:성공구건병사선도구유현저간우효솔적STAT6간우질립,위효천적기인치료연구전정료기출.
